[发明专利]一种糖与雷公藤内酯醇或其衍生物的缀合物及其制备方法与应用

说明书

本发明公布了一种糖与雷公藤内酯醇或其衍生物的缀合物及其制备方法与应用。该缀合物是由雷公藤内酯醇与糖不同位置的羟基通过连接体C连接后获得。制备方法是：（1）暴露出不同羟基位置的糖与丁二酸酐缩合形成羧基接头的中间体M1;（2）中间体M1在脱水剂EDCI、催化剂DMAP作用下与雷公藤内酯醇或其衍生物反应形成中间体M2；（3）中间体M2在H₂,Pd/C和Pd(OH)₂催化作用下去除所有苄基及苄叉基团即得。该缀合物相较母体化合物水溶性增强，并可通过肿瘤细胞膜高表达的葡萄糖转运蛋白转运到肿瘤细胞内，在细胞酯酶的作用下水解，释放出母体药物雷公藤内酯醇，提高雷公藤内酯醇对肿瘤组织的靶向性和抗肿瘤活性。

技术领域

本发明涉及抗肿瘤药物制备领域，具体涉及一种糖与雷公藤内酯醇或其衍生物的缀合物及其制备方法与应用。

背景技术

雷公藤内酯醇是卫矛科植物雷公藤的重要有效成分，1972年Kupchan等首次分离得到雷公藤内酯醇，并报道其对人鼻咽癌KB细胞株以及小鼠白血病L1210与P388体内模型具有很强的体内外抗肿瘤活性，此后国内外学者对其抗癌活性相继进行了研究。研究发现，其具有广泛而独特的生物学活性，例如抗癌，抗炎，抗类风湿病，抗阿尔茨海默氏病，抗慢性哮喘，抗骨质疏松症，免疫抑制和抗生育。雷公藤内酯醇在体外和体内对多种癌症均显示出良好的抗肿瘤活性，可作为临床候选药物。

最近的研究发现，雷公藤内酯醇抗肿瘤的重要靶点之一是与通用转录因子TFIIH的核心亚基XPB共价结合，并抑制TFIIH的DNA依赖的ATPase活性。雷公藤内酯醇还能诱导RNAPII的最大亚基RPB1的泛素化和蛋白酶体介导的RPB1降解，抑制RNAPII 合成RNA。

尽管雷公藤内酯醇对结肠癌等实体肿瘤有显著的抗肿瘤作用，限制其临床应用的主要原因是治疗窗口狭窄(最大耐受剂量为有效量的4-7倍)，水溶性差，半衰期短和严重的多器官毒性(特别是胃肠道、雄性生殖系统和骨髓毒性)等。

改善雷公藤内酯醇应用短板的主要策略，是将其选择性地递送到肿瘤细胞。根据肿瘤细胞在能量代谢方面主要依赖葡萄糖，肿瘤细胞膜葡萄糖转运载体显著高于正常细胞的特点，人们使用¹⁸F-FDG(2-氟-2-脱氧葡萄糖)在正电子发射断层扫描(PET)中作为放射性示踪剂，用于肿瘤成像。在健康的患者中，¹⁸F-FDG仅由组成性消耗葡萄糖的组织(如脑和膀胱)摄取。在癌症患者中，肿瘤细胞优先摄取¹⁸F-FDG，使临床医生识别肿瘤位点和转移灶，并用于癌症的分期和治疗的监测。因此，借助肿瘤细胞葡萄糖转运载体介导的靶向通过，使用葡萄糖衍生物作为活性药物的载体，可将化疗药物选择性地递送至癌细胞。第一个利用肿瘤细胞高水平糖酵解并通过临床试验的抗癌前体药物是 Glufosfamide(异环磷酰胺与葡萄糖结合)，具有比母体药物更低的骨髓毒性和更好的抗肿瘤活性。

近年来葡萄糖衍生物与化疗药物结合形成前药靶向肿瘤细胞的观点成为热门，如Bastien Reux用氟脱氧葡萄糖衍生物偶联苯丁酸氮芥合成了一系列化合物，与母体药物相比，其在体外表现出明显增加的细胞毒性。Lin将紫杉醇与葡萄糖衍生物结合形成缀合物，发现其作用机理与母体药物紫杉醇相似。在靶细胞中可以观察到微管蛋白和染色体的形态变化，并且前药可通过Glut-1转运到细胞中。Malay Patra通过将葡萄糖与铂化合物偶联，合理地设计了三种glu-Pts，发现它们对癌细胞具有高水平的细胞毒性，且主要通过Glut-1进行细胞摄取。He等(参考文献Targeted delivery and sustained antitumor activityof triptolide through glucose conjugation,Angew.Chem.Int.Ed.Engl.55(2016)12035-12039)采用雷公藤内酯醇和葡萄糖衍生物结合形成前药Glutriptolide。Glutriptolide与母体药物相比水溶性更好。它在体内可逐渐释放雷公藤内酯醇，具有更好的肿瘤分布选择性，并且体内的治疗指数显着改善，但其具有靶向性相对较弱、对肿瘤选择性相对较差的缺点。

发明内容