[发明专利]一种猫传染性腹膜炎卵黄抗体组合物及其制备方法和应用

说明书

本发明属于基因重组及抗体制备技术领域，具体公开了一种猫传染性腹膜炎卵黄抗体组合物及其制备方法和应用，该组合物是将猫肠道冠状病毒S蛋白卵黄抗体与Ⅰ型猫传染性腹膜炎病毒S蛋白卵黄抗体及Ⅱ型猫传染性腹膜炎病毒S蛋白卵黄抗体按相同效价下以(1‑2)：(1‑2)：(1‑2)的质量比混合获得，比单独一种抗体、两种抗体混合，以及三种抗体按照其他比例混合治疗猫传染性腹膜炎效果要好。既可以中和无临床症状表现的猫肠道冠状病毒感染从而达到预防猫传染性腹膜炎病毒感染，也可以中和有临床症状的猫传染性腹膜炎Ⅰ型和Ⅱ型的感染，从而达到治疗猫传染性腹膜炎的效果，特别是对Ⅰ型和Ⅱ型猫传染性腹膜炎病毒的交叉感染的治疗有较好的效果。

技术领域

本发明属于基因重组及抗体制备技术领域，尤其涉及一种猫传染性腹膜炎卵黄抗体组合物及其制备方法和应用。

背景技术

卵黄抗体(Immunoglobulin of yolk，IgY)是通过免疫产卵动物在其生产的蛋黄中提取的相应抗体，可用于相应疾病的预防和治疗。IgY的性质与哺乳动物的IgG相似，且IgY具有较强的耐热、耐酸、抗离子强度和一定的抗酶降解能力。

原核表达技术是指将外源目的蛋白的基因通过克隆技术构建表达载体并导入原核表达细胞如大肠埃希菌并表达的技术。Rosetta-gami2系列细胞能进行正确修饰和折叠而形成有生物活性的蛋白质同时兼备了真核表达的优点，且原核生长繁殖速度快，生产成本低廉，从而适合大规模生产。

猫传染性腹膜炎(Feline infectious peritonitis,FIP)是一种由猫传染性腹膜炎病毒(Feline infectious peritonitis virus，FIPV)感染引起的传染病，猫传染性腹膜炎目前很难医治，常用手段是使用441进行治疗，而用抗体治疗效果很差。在检验方面目前唯一权威性的FIP诊断方法是病理学检测，但由于样本获得的不易性导致临床开展较为不便。临床上常采用免疫组化(IHC)、间接荧光抗体检测(IFA)和逆转录PCR(RT-PCR)做为替代检测手段。其中RT-PCR检测时间短操作简单，配合特定的引物可以作为实验室检测FIPV的常规手段，并且配合测序可以做到型别的区分。而荧光定量PCR(qPCR)是PCR的一种定量手段，可以更精确地检测FIPV的病毒含量，这为本发明的效果检验提供了实验手段。

FIPV由猫肠道冠状病毒(Feline enteric coronavirus,FECV)突变而来。FIPV和FECV是猫冠状病毒(Feline coronavirus,FCoV)的两个生物型，但他们所产生的疾病大不相同。FIPV在临床上会导致猫患有传染性腹膜炎，是一种慢性型的、进行性的、致死性的疾病。而FECV通过粪-口途径传播，主要感染肠上皮细胞，在临床上一般不引起疾病。FIPV在临床上分为两种血清型：Ⅰ型和Ⅱ型。Ⅰ型在欧洲占大多数，而Ⅱ型在北美及日本占主导地位。但由于近年来我国宠物市场的繁荣，各种猫类的进口繁殖，从而导致FIPVⅠ型和Ⅱ型均在我国普遍流行，且常能检测出两种型别存在交叉混合感染的现象。Ⅰ型主要由FECV在巨噬细胞中产生突变，突变位置在S基因，而Ⅱ型主要是由Ⅰ型和犬冠状病毒(Canine Coronavirus，CCoV)重组产生，其重组部分主要发生在S基因部分。由于两者突变的产生和混合、交叉感染的情况导致猫传染性腹膜炎疫苗的研发困难重重，至今尚无有效疫苗，且该病尚无特效药物，因此，本发明提供了一种猫传染性腹膜炎卵黄抗体组合物及其制备方法和应用。

发明内容

为了解决上述问题，本发明的首要目的在于提供一种猫传染性腹膜炎卵黄抗体组合物及其制备方法和应用。

本发明的具体技术方案包括：

本发明提供了一种猫肠道冠状病毒S蛋白卵黄抗体在制备猫传染性腹膜炎治疗药物中的应用，所述猫肠道冠状病毒S蛋白卵黄抗体为通过重组猫肠道冠状病毒S蛋白免疫卵生动物后，再从卵生动物生产的蛋黄中提取获得。