[发明专利]一种一氧化氮纳米前药及其制备方法与应用

权利要求书

1.一种一氧化氮纳米前药，其特征在于，所述一氧化氮纳米前药为脱镁叶绿酸盐A、N-乙酰基-3-亚硝基硫醇-D-缬氨酸和聚乙二醇2000-羧基共修饰的PAMAM聚合物。

2.根据权利要求1所述的一氧化氮纳米前药，其特征在于，所述PAMAM为第四代PAMAM。

3.如权利要求1所述的一氧化氮纳米前药的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

(1)PAMAM-PA的合成：脱镁叶绿酸盐A与PAMAM上的游离氨基发生酰胺化反应形成PAMAM-PA；

(2)N-乙酰基-2,2-二甲基-4-氧代-3-硫杂环丁烷的合成：N-乙酰基-D-青霉胺与乙酸酐和吡啶发生反应形成硫内酯，得N-乙酰基-2,2-二甲基-4-氧代-3-硫杂环丁烷；

(3)PAMAM-PA/SH的合成：N-乙酰基-2,2-二甲基-4-氧代-3-硫杂环丁烷开环并与PAMAM-PA上的游离氨基反应生成PAMAM-PA/SH；

(4)PAMAM-PA/SNO的合成：PAMAM-PA/SH的巯基上的氢被亚硝基取代形成PAMAM-PA/SNO；

(5)一氧化氮纳米前药的合成：PAMAM-PA/SNO上游离的氨基PAMAM-PA/SNO与聚乙二醇2000-羧基发生酰胺化反应后纯化得一氧化氮纳米前药。

4.根据权利要求3所述制备方法，其特征在于，所述步骤(1)中，发生酰胺化反应形成PAMAM-PA包括以下步骤：将脱镁叶绿酸盐A、N-羟基琥珀酰亚胺和1-(3-二甲基氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺加入到二甲基亚砜中，并于室温下搅拌2-4h，接着加入PAMAM在室温下继续搅拌反应18-24h，反应结束后，透析、冷冻干燥，得PAMAM-PA；

所述脱镁叶绿酸盐A、N-羟基琥珀酰亚胺、1-(3-二甲基氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺和PAMAM的质量比为脱镁叶绿酸盐A：N-羟基琥珀酰亚胺：1-(3-二甲基氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺：PAMAM＝1：(1-2)：(1-2)：(0.05-0.1)。

5.根据权利要求3所述的制备方法，其特征在于，所述步骤(2)中，N-乙酰基-D-青霉胺、吡啶和乙酸酐的质量体积比为N-乙酰基-D-青霉胺：吡啶：乙酸酐＝(0.1-1)g：1g：1mL。

6.根据权利要求3所述的制备方法，其特征在于，所述步骤(3)中，反应生成PAMAM-PA/SH包括以下步骤：将PAMAM-PA和N-乙酰基-2,2-二甲基-4-氧代-3-硫杂环丁烷N-乙酰基-2,2-二甲基-4-氧代-3-硫杂环丁烷溶解于二甲基亚砜中，室温搅拌20-24h，接着透析、冷冻干燥，得PAMAM-PA/SH；其中，PAMAM-PA和N-乙酰基-2,2-二甲基-4-氧代-3-硫杂环丁烷的摩尔质量比为(4-5)：1，PAMAM-PA与二甲基亚砜的质量体积比为(6-6.5)mg：1mL。

7.根据权利要求3所述的制备方法，其特征在于，所述步骤(4)中，形成PAMAM-PA/SNO包括以下步骤：将亚硝酸叔丁酯与PAMAM-PA/SH混合，于0℃下避光搅拌8-12h后，超滤、冷冻干燥，得PAMAM-PA/SNO；其中，PAMAM-PA/SH与亚硝酸叔丁酯的摩尔质量比为(3.5-4)：1。