[发明专利]富含类胡萝卜素鸡蛋对健康影响测定方法及蛋鸡养殖方法

权利要求书

1.一种富含类胡萝卜素鸡蛋对健康影响测定方法，其特征在于，所述富含类胡萝卜素鸡蛋对健康影响测定方法包括：给成人提供两种鸡蛋；对照组为喂豆油饲料的鸡蛋，SO-蛋；干预组为喂毛棕榈油饲料的鸡蛋，CPO-蛋；对照组60例，干预组60例；每个成年人每天均有一种鸡蛋作为补充餐，干预期间告知监护人不要补充维生素A，干预时间为两个月。

2.如权利要求1所述的富含类胡萝卜素鸡蛋对健康影响测定方法，其特征在于，所述富含类胡萝卜素鸡蛋对健康影响测定方法包括以下步骤：

步骤一，进行样品采集；

步骤二，进行健康影响分析；

步骤三，进行统计分析。

3.如权利要求2所述的富含类胡萝卜素鸡蛋对健康影响测定方法，其特征在于，步骤一中，所述样品采集，包括：

(1)膳食调查：在干预前采用三天24小时膳食调查法，通过询问以及称重的方式调查干预前三日的食物种类和数量，以及参与者的摄入量；每两周记录一次富含维生素A食物的摄入频率；

(2)血样采集：在试验开始前采集受试者的血样，记录基线值；五个月结束时采集两份血样；采集空腹静脉血6ml，在室内阴暗处保存30min；将1500×g的标本离心15min，分离出血清，分离后应在-20℃冰箱保存；

(3)肠道微生物区系：干预前及干预后收集排泄物，两次收集排泄物存放在液氮罐中；采用Chiaamp Fast DNA粪便迷你试剂盒提取粪便细菌基因组DNA，用1％琼脂糖凝胶电泳检测，根据细菌基因组的完整性和浓度，选择符合要求的标本保存。

4.如权利要求2所述的富含类胡萝卜素鸡蛋对健康影响测定方法，其特征在于，步骤二中，所述健康影响分析，包括：

(1)血清视黄醇和视黄醇酯的浓度：用反相高效液相色谱法HPLC测定血清视黄醇和视黄醇酯的浓度；

(2)血清生化指标：用诊断试剂和全自动生化分析仪检测总胆固醇TC、甘油三酯TG、低密度脂蛋白胆固醇LDL-C和高密度脂蛋白胆固醇HDL-C；酶比色法测定TC和TG，直接清除法测定LDL-C和HDL-C；

(3)血清脂肪酸：用Folch法提取血清总脂，经乙酰氯-甲醇法甲酯化后，用气相色谱-质谱联用仪对血清中37种脂肪酸进行定量分析；

(4)肠道微生物群16S rRNA V3区的高通量测序：提取粪便中微生物的总DNA，用聚合酶链反应PCR扩增肠道微生物群16S rRNA V3区，用离子激流PGM法测序。

5.如权利要求4所述的富含类胡萝卜素鸡蛋对健康影响测定方法，其特征在于，步骤(1)中，所述血清视黄醇和视黄醇酯均包括基线和1,2钼。

6.如权利要求2所述的富含类胡萝卜素鸡蛋对健康影响测定方法，其特征在于，步骤三中，所述统计分析，包括：

所有的实验和测量进行一式三份，数据使用单因素方差分析ANOVA进行分析，数据以P0.05的置信度表示。

7.一种应用如权利要求1～6任意一项所述的富含类胡萝卜素鸡蛋对健康影响测定方法的蛋鸡养殖方法，其特征在于，所述蛋鸡养殖方法包括以下步骤：

第一步，选用180日龄、体重、产蛋率相近的海兰褐蛋鸡；

第二步，进行饲料的配置；

第三步，进行饲养管理。

8.如权利要求7所述的蛋鸡养殖方法，其特征在于，第二步中，所述饲料的配置，包括：

对照组添加3％大豆油，实验组添加3％CPO，所述饲料用量如下：

基础日粮：农场自产饲料，无多余油脂，用于为实验组配制饲料；

对照组：基础饲料+3％大豆油；

3％CPO组：基础饲料+3％CPO；

根据《家禽营养需要》和《鸡饲养标准》制备玉米豆粕粉基础饲料。