[发明专利]一株分泌抗丙炔氟草胺单克隆抗体的杂交瘤细胞株及其应用有效
申请号: | 202210530428.1 | 申请日: | 2022-05-16 |
公开(公告)号: | CN114774368B | 公开(公告)日: | 2023-06-06 |
发明(设计)人: | 胥传来;王鹏;匡华;徐丽广;孙茂忠;刘丽强;吴晓玲;宋珊珊;胡拥明;郝昌龙;吴爱红;郭玲玲;胥欣欣;倪萍;毕雪威 | 申请(专利权)人: | 江南大学;无锡杰圣杰康生物科技有限公司 |
主分类号: | C12N5/20 | 分类号: | C12N5/20;C07K16/44;G01N33/577;G01N33/53;C12R1/91 |
代理公司: | 苏州市中南伟业知识产权代理事务所(普通合伙) 32257 | 代理人: | 杨慧林 |
地址: | 214122 江苏*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 分泌 丙炔 氟草胺 单克隆抗体 杂交瘤 细胞株 及其 应用 | ||
1.一株分泌抗丙炔氟草胺单克隆抗体的杂交瘤细胞株,其特征在于,所述杂交瘤细胞株于2021年05月13日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心,保藏地址北京市朝阳区北辰西路1号院3号,保藏编号CGMCC No.22334。
2.一种分泌抗丙炔氟草胺单克隆抗体的杂交瘤细胞株的制备方法,其特征在于,包括以下步骤:
S1:取丙炔氟草胺和巯基丙酸溶于有机溶剂中,并加入碳酸钾,加热回流反应,待反应结束后将反应液分离纯化得到丙炔氟草胺半抗原;
S2:利用S1中所述丙炔氟草胺半抗原制备丙炔氟草胺完全抗原,将丙炔氟草胺完全抗原与完全弗氏佐剂制备得到免疫原1,所得丙炔氟草胺完全抗原和不完全弗氏佐剂乳化得到免疫原2;所述丙炔氟草胺半抗原的结构式:,n=1;
S3:将S2中所得免疫原1对小鼠进行皮下免疫;
S4:将S3中免疫后的小鼠使用S2中免疫原2再进行加强免疫,并使用丙炔氟草胺完全抗原进行冲刺免疫;
S5:取S4中冲刺免疫后的小鼠的脾细胞和骨髓瘤细胞,进行细胞融合,得到所述杂交瘤细胞株;
制备丙炔氟草胺完全抗原的步骤:所得丙炔氟草胺半抗原、N-羟基琥珀酰亚胺和1-乙基碳二亚胺盐酸盐混合溶解于有机溶剂中,反应得到混合物,并将丙炔氟草胺半抗原加入牛血清白蛋白BSA溶液中进行反应,得到偶联物丙炔氟草胺-BSA,即所述丙炔氟草胺完全抗原。
3.权利要求1中所述杂交瘤细胞株在制备抗丙炔氟草胺单克隆抗体中的应用。
4.一种抗丙炔氟草胺单克隆抗体,其特征在于,所述抗丙炔氟草胺单克隆抗体是由权利要求1所述的杂交瘤细胞株分泌所得。
5.如权利要求4所述的抗丙炔氟草胺单克隆抗体在检测丙炔氟草胺中的应用。
6.一种组合物,其特征在于,所述组合物包括权利要求4中所述的抗丙炔氟草胺单克隆抗体。
7.如权利要求6所述的组合物在检测丙炔氟草胺中的应用。
8.一种试剂盒,其特征在于,所述试剂盒包括权利要求4中所述的抗丙炔氟草胺单克隆抗体。
9.如权利要求8所述的试剂盒在检测丙炔氟草胺中的应用。
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