[发明专利]一种用于菌糠饲料化的菌剂及制备方法在审
| 申请号: | 202210516032.1 | 申请日: | 2022-05-12 |
| 公开(公告)号: | CN114752592A | 公开(公告)日: | 2022-07-15 |
| 发明(设计)人: | 朱健东;蔡露漪;兰莎莎;寿贝乙;夏宇航;叶瀚辰;米紫璇;陈虹宇;潘蕾蕾;丁佳妍;蔡妙珍 | 申请(专利权)人: | 浙江师范大学 |
| 主分类号: | C12N15/01 | 分类号: | C12N15/01;C12N13/00;C12N1/14;A23K10/37;A23K10/12;A23K20/163 |
| 代理公司: | 杭州知学知识产权代理事务所(普通合伙) 33356 | 代理人: | 何红信 |
| 地址: | 321000 *** | 国省代码: | 浙江;33 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 一种 用于 饲料 制备 方法 | ||
1.一种用于菌糠饲料化的菌剂的制备方法,其特征在于,包括以下步骤:
(1)获取白腐真菌并对白腐真菌进行紫外微波复合诱变:
(11)制备1×106个/mL白腐真菌的单孢子悬浮液;
(12)按照每81cm2设置10mL单孢子悬浮液,将悬浮液至于平皿内,并在紫外灯下照射8min;
(13)筛选培养后,取重新培养长出的孢子,制成1x106个/mL单孢子悬浮液,置于20mL的厌氧管中且每个厌氧管配置单孢子悬浮液5mL,用600W微波辐射2-3min,得到诱变后的白腐真菌菌株;
(2)在培养基上接种诱变后的白腐真菌,并在28℃培养3d后接种黑曲霉菌;共同培养10d后与细麸皮按照1:1的质量比例混合,34℃恒温烘干至水分低于10.4%,装袋保存;所述白腐真菌和黑曲霉菌接种时的质量比例为1:1。
2.根据权利要求1所述的一种用于菌糠饲料化的菌剂的制备方法,其特征在于:所述培养基由1000体积份的马铃薯提取液、20质量份的葡萄糖、15质量份的琼脂和1000体积份的纯水配置而成;并将配置好的培养基采用121℃灭菌30min;所述1体积份:1质量份=1ml:1g。
3.根据权利要求1所述的一种用于菌糠饲料化的菌剂的制备方法,其特征在于:所述马铃薯提取液制备方法为:
向200质量份的去皮且切成小块的马铃薯加入1000体积份的水,煮沸30min后,滤去马铃薯块获得;并向滤液中加水补足至1000体积份;所述1体积份:1质量份=1ml:1g。
4.根据权利要求1所述的一种用于菌糠饲料化的菌剂的制备方法,其特征在于:所述白腐真菌的获取方法包括:
(1)前期准备:
(11)采集带有白腐真菌菌点的树皮和腐败的树枝作为子实体;
(12)制备PDA培养基,在高压灭菌锅中121℃条件下对PDA培养基、玻璃培养皿和镊子灭菌30min;将灭菌后的PDA培养基、玻璃培养皿和镊子放到工作台中并在紫外灯下照射冷却;在酒精灯火焰旁将冷却的PDA培养基倒平板,放置待PDA培养基凝固,得到PDA平板;
(2)筛选:
(21)将切成小块且带有白腐真菌菌种的子实体用超纯水冲洗3次并用无菌滤纸擦干,置于超净工作台中;用镊子将小块的子实体接种到PDA平板中,并将接种后的PDA平板放到28℃的生化培养箱中培养6-8d直到平板中长满菌丝;
(22)将PDA平板中的白色丝状菌体转接到MEA平板中,并在28℃的生化培养箱中培养6-8d直到MEA平板中长满菌丝;将MEA平板上的长满的菌丝转移到新的MEA平板上,并重复将MEA平板上的长满的菌丝转移到新的MEA平板上的步骤,直到MEA平板中的菌丝为纯白色作为最终获取的白腐真菌。
5.一种用于菌糠饲料化的菌剂,其特征在于:由权利要求1至4任一所述的一种用于菌糠饲料化的菌剂的制备方法制备而成。
6.一种菌糠饲料的制备方法,其特征在于,包括以下步骤:
将2.5质量份的菌剂、12.5质量份的红糖、2500质量份的水混合后密封放置8小时,制成菌液;所述菌剂由权利要求1至5任一所述的一种用于菌糠饲料化的菌剂的制备方法制备而成;
在容积为110000体积份的圆柱状容器中加入菌液和500000质量份的菌糠,翻搅均匀;发酵过程持续向容器中鼓风,通风量为1立方米/小时;在18~20℃,50~60%湿度环境下发酵7天;所述1体积份:1质量份=1ml:1g。
7.一种菌糠饲料,其特征在于,由权利要求6所述的一种菌糠饲料的制备方法制备而成。
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