[发明专利]一种小肽衍生物在提高自然杀伤细胞杀伤力和迁移活性中的应用

说明书

本发明公开了一种小肽衍生物在提高自然杀伤细胞杀伤力和迁移活性中的应用，属于生物领域，涉及小肽衍生物在自然杀伤细胞培养中的应用。本发明请求保护一种小肽衍生物在体外提高自然杀伤细胞杀伤力和迁移活性中的应用，所述小肽衍生物为N‑Formyl‑MLFK。本发明通过实验发现，小肽衍生物N‑Formyl‑MLFK不仅可以提高自然杀伤细胞的杀伤力还可以提高其迁移活性，这有助于自然杀伤细胞发挥其杀伤作用。

技术领域

本发明涉及自然杀伤细胞，尤其涉及一种小肽衍生物在提高自然杀伤细胞杀伤力和迁移活性中的应用。

背景技术

自然杀伤(NK)细胞是机体抵抗病原微生物感染及清理自身癌变细胞的重要固有免疫细胞。NK细胞的功能受抑制型受体和活化型受体介导的信号强度之间的平衡来调节，活化后的NK细胞可直接杀伤靶细胞，也可以分泌细胞因子和炎性因子参与免疫调节。近年来，基于NK细胞免疫功能的抗肿瘤免疫疗法成为肿瘤治疗的新兴热门领域。

NK细胞的杀伤力和迁移活性对NK细胞发挥免疫功能具有重要影响，强杀伤力和强迁移活性的NK细胞对靶细胞具有较强的杀伤清除能力。

因此，提高NK细胞的杀伤力和迁移活性是NK细胞研究的重要方向。

发明内容

本发明的目的在于提供一种小肽衍生物在提高自然杀伤细胞杀伤力和迁移活性中的应用，该小肽衍生物为N-Formyl-MLFK。

为实现上述目的，本发明提供了以下技术方案：

一种小肽衍生物在体外提高自然杀伤细胞杀伤力和迁移活性中的应用，所述小肽衍生物为N-Formyl-MLFK。

一种小肽衍生物在制备提高自然杀伤细胞杀伤力和迁移活性的培养液中的应用，所述小肽衍生物为N-Formyl-MLFK。

本发明通过实验发现：小肽衍生物N-Formyl-MLFK不仅可以提高自然杀伤细胞的杀伤力还可以提高其迁移活性，这有助于自然杀伤细胞发挥其杀伤作用。

附图说明

图1中(A)是各组NK细胞中Granzyme B、Perforin蛋白表达水平测定结果，(B)是各组NK细胞的迁移拍照，其中Blank代表对照，High代表50μg/mLN-Formyl-MLFK干预，Low代表25μg/mLN-Formyl-MLFK干预。

具体实施方式

一、实验材料

人外周血单个核细胞(PBMC)购自武汉赛奥斯生物科技有限公司。RPMI 1640培养基和FBS购自Gibco公司。流式抗体购自BD。人源NK细胞完全培养基的品牌为Procell，购自武汉普诺赛生命科技有限公司。

N-Formyl-MLFK，即N-Formyl-Met-Leu-Phe-Lys，购自南京金斯瑞生物科技有限公司，产品编号RP12958，纯度≥95％。

二、实验方法

1、PBMC的复苏、传代和冻存

1.1复苏

1)将恒温水浴锅中的水预热到37℃；

2)准备一支15mL离心管，加入5mL含10％FBS的RPMI 1640完全培养基，放入37℃水浴锅中预热；

3)戴上护目镜，厚毛线手套后，从液氮罐中取出要复苏的细胞，尽快转入37℃恒温水浴锅中复温晃动冻存管以提高复温速率；

4)将融化了的冻存管中的细胞吸入事先准备的离心管中，混匀后，1000rpm离心5min；

5)准备一个T-25培养瓶，写上细胞名称、日期，再加入4mL完全培养基；