[发明专利]一种解除胰腺癌免疫抑制性微环境的方法在审
申请号: | 202210506572.1 | 申请日: | 2022-05-11 |
公开(公告)号: | CN114807014A | 公开(公告)日: | 2022-07-29 |
发明(设计)人: | 黄品同;王雪;张涛;施展;曾意晴;骆佳莉;陈立斌 | 申请(专利权)人: | 浙江大学 |
主分类号: | C12N5/071 | 分类号: | C12N5/071;C12N5/09;A01K67/027;C12Q1/02;G01N33/58;A61D7/00;G16B25/10 |
代理公司: | 北京子焱知识产权代理事务所(普通合伙) 11932 | 代理人: | 胡强 |
地址: | 310013 浙江*** | 国省代码: | 浙江;33 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 解除 胰腺癌 免疫抑制 环境 方法 | ||
1.一种解除胰腺癌免疫抑制性微环境的方法,其特征在于:包括以下步骤:
S1、小鼠荧光素酶稳转胰腺癌Panc02细胞在DMEM中生长,添加质量分数为10%的FBS、1%的青霉素和链霉素,细胞在37℃的浓度为5%的CO2培养箱中培养;
S2、将荧光素酶稳转胰腺癌Panc02细胞注射到模型小鼠胰腺中,建立原位Panc02小鼠胰腺癌模型,植入后第6天,通过在每个时间点注射荧光素并在暴露5s后通过IVIS系统成像来监测原位肿瘤生长,将出现肿瘤的小鼠分出;
S3、小鼠胰腺癌Panc02细胞在DMEM中生长,添加质量分数为10%的FBS、1%的青霉素和链霉素,细胞在37℃的浓度为5%的CO2培养箱中培养;
S4、将Panc02细胞注射在上述的小鼠右侧背部,构建远处瘤模型;
S5、尾静脉注射100μL磷脂包裹的六氟化硫微泡(SonovueTM,Bracco,Italy),随即即刻对胰腺癌原位肿瘤进行超声辐照(1.0MHz,0.5W/cm2,20%duty cycle)5min。
S6、收集不同治疗的Panc02肿瘤进行转录组分析(Novelbio Ltd.,China),通过Illumina质量过滤器的高质量读数被保留用于序列分析并映射到GRCm38。
2.根据权利要求1所述的一种解除胰腺癌免疫抑制性微环境的方法,其特征在于:对不同治疗下的Panc02肿瘤进行转录组分析,数据均数±标准差,差异表达基因的显着性分析遵循倍数变化1.5或0.667和P0.05的标准。
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