[发明专利]一种R-5,7-二氟苯并二氢吡喃-4-醇的制备方法

说明书

本发明属于医药技术领域，具体涉及一种R‑5,7‑二氟苯并二氢吡喃‑4‑醇的制备方法。本发明的制备方法是以5,7‑二氟苯并二氢吡喃‑4‑酮为底物，在酮还原酶、辅酶和辅酶循环体系存在的条件下发生不对称还原反应，得到R‑5,7‑二氟苯并二氢吡喃‑4‑醇。本发明的酶催化反应转化率极高，手性选择性好，且仅使用少量环境友好型有机溶剂、反应条件温和、工艺操作简单，适合R‑5,7‑二氟苯并二氢吡喃‑4‑醇的工业化生产，具有很好的应用前景。

技术领域

本发明属于医药技术领域，具体涉及一种R-5,7-二氟苯并二氢吡喃-4-醇的制备方法。

背景技术

传统治疗酸相关的疾病的药物是质子泵抑制剂(PPI)。尽管PPI的治疗效果让人满意，但是其仍然存在一些不足之处，例如：在血浆中的半衰期短、药效受食物摄入量的影响、发挥药效时间太长等。而钾离子竞争性酸阻滞剂(P-CAB)是一类新型药物，通过与壁细胞中的H+/K+-ATPase竞争性和可逆性结合，表现出快速有效的抗分泌活性。

特戈拉赞是一种新型的P-CAB，自2018年7月起，特戈拉赞在韩国被批准用于治疗胃食管反流病、胃溃疡和根除幽门螺杆菌。

R-5,7-二氟苯并二氢吡喃-4-醇是合成特戈拉赞的重要中间体，其结构式如下：

目前合成R-5,7-二氟苯并二氢吡喃-4-醇主要是采取化学法合成，如：专利CN101341149B、CN107849003A以及CN109320485A。此类方法主要使用手性催化剂达到不对称氢化的效果，存在手性催化剂价格昂贵、产品提纯困难、收率不理想、环境污染等不足。与化学合成相比，酶催化具有反应条件温和、立体选择性高、催化活性高后处理简单等特点。目前利用酶催化制备有机化合物的研究已有较多报道，例如“CN109852593A-一种重组酮还原酶及在制备R-3-羟基丁酸及其盐中的应用”通过重组酮还原酶成功制备了醇类。

然而，由于R-5,7-二氟苯并二氢吡喃-4-醇中官能团和手性位置的差异，这些现有技术中已报道的酶体系并不能够实现其酶催化合成或转化率较低。目前也尚未找到其他合适的酶实现将其他易获得的底物转化为R-5,7-二氟苯并二氢吡喃-4-醇。因此，R-5,7-二氟苯并二氢吡喃-4-醇的酶催化合成仍然是本领域亟需解决的问题。

发明内容

针对现有技术的缺陷，本发明提供一种R-5,7-二氟苯并二氢吡喃-4-醇的制备方法，目的在于选择合适的酶催化体系，实现R-5,7-二氟苯并二氢吡喃-4-醇的酶催化合成。

一种R-5,7-二氟苯并二氢吡喃-4-醇的制备方法，它是以5,7-二氟苯并二氢吡喃-4-酮为底物，在酮还原酶、辅酶和辅酶循环体系存在的条件下发生不对称还原反应，得到R-5,7-二氟苯并二氢吡喃-4-醇；

其中，酮还原酶为短链脱氢酶SDR、中链脱氢酶MDR或醛酮还原酶AKR中的一种或两种及以上的组合。

优选的，所述的辅酶循环体系为GDH-葡萄糖辅酶循环体系或异丙醇辅酶循环体系。

优选的，所述辅酶为NAD或NADP。

优选的，所述反应在0.01-0.4mol/L的PBS缓冲液中进行。

优选的，所述反应的pH条件为6.5-7.0。

优选的，所述反应的温度为30～37℃，时间为12～24h。

优选的，所述5,7-二氟苯并二氢吡喃-4-酮在反应体系中的浓度为30-100g/L。

优选的，反应过程中，酮还原酶加入反应体系的形式为表达酮还原酶的重组大肠杆菌湿菌体或液体酶。

优选的，所述重组大肠杆菌湿菌体在反应体系中的浓度为30g/L～100g/L；