[发明专利]制备(2S,3R)-2-(邻苯二甲酰亚胺基甲基)-3-羟基丁酸酯的方法在审
| 申请号： | 202210483357.4 | 申请日： | 2022-05-05 |
| 公开（公告）号： | CN114774491A | 公开（公告）日： | 2022-07-22 |
| 发明（设计）人： | 陶荣盛;李涛;朱傅赟;潘震华;原犇犇;沈正权;沈青;郑云;孙梁栋;刘萍;胡海亮 | 申请（专利权）人： | 湖州颐盛生物科技有限公司 |
| 主分类号： | C12P17/10 | 分类号： | C12P17/10;C12N9/04;C12N15/70;C12N15/53 |
| 代理公司： | 上海申浩律师事务所 31280 | 代理人： | 贾师英 |
| 地址： | 313000 浙江省*** | 国省代码： | 浙江;33 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 制备 二甲 胺基 甲基 羟基 丁酸 方法 | ||
1.一种酶催化制备(2S,3R)-2-(邻苯二甲酰亚胺基甲基)-3-羟基丁酸酯的方法，包括如下步骤：
以式I所示的2-(邻苯二甲酰亚胺基甲基)-3-氧代丁酸酯为底物，使用羰基还原酶SEQID NO:1或者其同源性≥80％的同工酶催化还原反应，得到式II所示的(2S,3R)-2-(邻苯二甲酰亚胺基甲基)-3-羟基丁酸酯：
其中，R为C1-C4烷基，选自甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、异丁基、叔丁基。
2.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述R为甲基或乙基。
3.如权利要求1所述的方法，其特征在于，反应体系中，所述羰基还原酶SEQ ID NO:1或者所述同工酶呈酶形式或者其表达微生物菌体形式。
4.如权利要求3所述的方法，其特征在于，所述羰基还原酶SEQ ID NO:1或者所述同工酶为游离酶或者固定化酶。
5.如权利要求3所述的方法，其特征在于，所述微生物选自枯草芽孢杆菌、短乳杆菌、大肠杆菌、木兰假丝酵母、毕赤酵母、酿酒酵母。
6.如权利要求3所述的方法，其特征在于，所述微生物是大肠杆菌。
7.如权利要求6所述的方法，其特征在于，所述羰基还原酶SEQ ID NO:1的编码基因的核苷酸序列为SEQ ID NO:2。
8.如权利要求1所述的方法，其特征在于，反应体系中添加有异丙醇和辅酶NADP+或NAD+。
9.如权利要求1所述的方法，其特征在于，反应在葡萄糖脱氢酶、葡萄糖和辅酶NADP+或NAD+的存在下进行。
10.如权利要求1所述的方法，其特征在于，反应体系pH值为6.9-7.1。
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