[发明专利]黄连中生物碱的检测方法

说明书

本发明涉及一种黄连中生物碱的检测方法，所述检测方法包括以下步骤：用包埋剂浸润待测黄连样品，冷冻，制切片；将所述切片贴合在载片上，采用二次离子飞行时间质谱法检测所述切片中的生物碱；其中，所述黄连样品为黄连鲜品或者经润湿处理的黄连干品，润湿处理采用的溶剂包含水；所述包埋剂包含聚乙二醇和聚乙烯醇的水溶性混合物。本发明首次将二次离子飞行时间质谱法引入到黄连生物碱的检测中，无需先对黄连样品中的生物碱成分进行富集/提取，操作简单，干扰少，能有效避免生物碱损失，检测精密度、准确性、重现性和稳定性好，检测结果能直观呈现，检测效率高。

技术领域

本发明属医药技术领域，具体涉及一种黄连中生物碱的检测方法。

背景技术

黄连为毛莨科植物黄连Coptis chinensis Franch、三角叶黄连Coptisdeltoidea C.Y.Cheng et Hsiao和云连Coptis teeta Wall.的干燥根茎。在临床应用中，黄连及其化学成分常用于治疗痢疾、糖尿病及其并发症和失眠等多种疾病。现代研究表明，黄连的药理作用主要与其所含的生物碱有关。因此，黄连中生物碱的检测对黄连的质量控制至关重要。

传统上主要采用光谱、高效液相色谱法或者液-质联用技术检测各细胞或者组织中的生物碱含量。虽然这些传统方法能够实现黄连中生物碱的检测，但干扰因素较多(包括生物碱富集、提取等操作及其所涉及溶剂的干扰)且无法避免生物碱损失，所得结果难以客观反映黄连中生物碱的真实情况。因此，如何在检测黄连生物碱的过程中有效降低干扰和避免生物碱损失是亟待解决的技术问题。

发明内容

基于此，本发明的目的包括提供一种黄连中生物碱的检测方法，采用该检测方法检测黄连中的生物碱，干扰少，能有效避免生物碱损失。

本发明的目的可以通过以下技术方案实现：

一种黄连中生物碱的检测方法，所述检测方法包括以下步骤：

用包埋剂浸润待测黄连样品，冷冻，制切片；

将所述切片贴合在载片上，采用二次离子飞行时间质谱法检测所述切片中的生物碱；

其中，

所述黄连样品为黄连鲜品或者经润湿处理的黄连干品，润湿处理采用的溶剂包含水；

所述包埋剂包含聚乙二醇和聚乙烯醇的水溶性混合物。

在本发明的一些实施方式中，所述包埋剂为OCT包埋剂或者所述OCT包埋剂和水的混合物。

在本发明的一些实施方式中，所述生物碱选自如下种类中的1种、2种、3种、4种、5种或者6种：小檗碱、黄连碱、巴马汀、氧化小檗碱和非洲防己碱。

在本发明的一些实施方式中，所述二次离子飞行时间质谱法的质谱条件包括：

模式为聚束模式；

初级离子为Bi1⁺、Bi3⁺或者Bi3²⁺；

能量为20keV～30keV；

离子束流为0.3pA～1pA。

在本发明的一些实施方式中，所述二次离子飞行时间质谱法的质谱条件还包括：

采集面积为1×1mm²～10×10mm²；或/和，

采集像素为32×32pixel²～1024×1024pixel²；或/和，

横向分辨率为3μm～8μm；或/和，

次级离子的种类为正离子；或/和，