[发明专利]一种脱细胞瘢痕皮肤支架材料及其制备方法与应用在审
申请号: | 202210438195.2 | 申请日: | 2022-04-20 |
公开(公告)号: | CN114732959A | 公开(公告)日: | 2022-07-12 |
发明(设计)人: | 赖晨智;宗宪磊;靳小雷;宋国栋 | 申请(专利权)人: | 中国医学科学院整形外科医院 |
主分类号: | A61L27/60 | 分类号: | A61L27/60;A61L27/36 |
代理公司: | 北京轻创知识产权代理有限公司 11212 | 代理人: | 姜展志 |
地址: | 100144 *** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 细胞 瘢痕 皮肤 支架 材料 及其 制备 方法 应用 | ||
1.一种脱细胞瘢痕皮肤支架材料的制备方法,其特征在于,包括如下步骤:
步骤1:切除瘢痕标本中表皮及皮下组织,将获得的组织切成的薄片,再将薄片中的病毒进行灭活;
步骤2:将步骤1处理后的薄片中细胞进行溶解;
步骤3:将步骤2处理后的薄片储存于抗生素溶液中,并置于低温条件下备用,即完成脱细胞瘢痕皮肤支架材料的制备。
2.根据权利要求1所述的脱细胞瘢痕皮肤支架材料的制备方法,其特征在于,所述步骤1中薄片病毒灭活方式是:将薄片置于消毒液中浸泡1.5-2.5h,然后将薄片取出后洗除残留的消毒液即可。
3.根据权利要求2所述的脱细胞瘢痕皮肤支架材料的制备方法,其特征在于,所述消毒液为过氧乙酸和乙醇混合的水溶液,其中,所述消毒液中过氧乙酸的浓度为1vol%,所述消毒液中乙醇的浓度为24vol%。
4.根据权利要求2所述的脱细胞瘢痕皮肤支架材料的制备方法,其特征在于,所述薄片洗除残留消毒液的方式是:先将薄片置于无菌的PBS缓冲液或无菌的生理盐水中浸泡20-40min,中途更换1-3次浸泡液,然后再将薄片置于纯水中清洗1-3次,每次清洗时长为5-15min。
5.根据权利要求2所述的脱细胞瘢痕皮肤支架材料的制备方法,其特征在于,所述步骤2中薄片中细胞溶解的方式是:将薄片先置于细胞膜消解液中浸泡2h并持续振荡,再将薄片取出再置于细胞核消解液中,并在37℃下持续振荡72小时,期间每间隔24小时更换一次细胞核消解液,最后将薄片取出后洗除残留的细胞核消解液即可。
6.根据权利要求5所述的脱细胞瘢痕皮肤支架材料的制备方法,其特征在于,所述细胞膜消解液为胰蛋白酶和EDTA-Na2混合的水溶液,所述细胞膜消解液中的胰蛋白酶浓度为2.5g/L,所述细胞膜消解液中的EDTA-Na2的浓度为0.5mmol/L。
7.根据权利要求5所述的脱细胞瘢痕皮肤支架材料的制备方法,其特征在于,所述细胞核消解液为浓度为1vol%的Triton X-100溶液。
8.根据权利要求5所述的脱细胞瘢痕皮肤支架材料的制备方法,其特征在于,所述薄片洗除残留细胞核消解液的方式是:先将薄片置于无菌的PBS缓冲液或无菌的生理盐水中浸泡20-40min,中途更换1-3次浸泡液,然后再将薄片置于纯水中清洗1-3次,每次清洗时长为5-15min。
9.一种采用如权利要求1-8任一项所述制备方法所制得的脱细胞瘢痕皮肤支架材料。
10.一种如权利要求9所述脱细胞瘢痕皮肤支架材料在制备真皮支架中的应用。
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