[发明专利]一种基于UPLC-Q-TOF-MS技术的竹叶青酒化学成分快速识别的方法

权利要求书

1.一种基于UPLC-Q-TOF-MS的竹叶青酒化学成分快速识别的方法，其特征在于：采用UPLC-Q-TOF-MS技术对竹叶青酒进行快速在线检测分析，将采集到的原始质谱数据运用PeakView2.0软件进行峰匹配分析处理；将采集到的原始质谱数据和对应的正负离子模式处理方法导入SCIEX OS-Q -AnaLyst数据分析软件得到数据处理结果；在总结竹叶青酒中已报道的化合物的一级、二级质谱碎片离子的前提下，结合AB SCIEX公司数据库提供的中药化学成分数据库进行计算匹配，通过一维UPLC的保留时间锁定化合物，通过精确质量数、同位素丰度比以及多级碎片离子质谱裂解规律对化合物进行鉴定，偏差为5ppm；将化合物名称、保留时间、分子式、质荷比、以及对应的二级离子碎片和误差进行收集；对竹叶青酒中的化学成分进行系统全面的表征。

2.根据权利要求1所述的一种基于UPLC-Q-TOF-MS的竹叶青酒化学成分快速识别的方法，其特征在于：具体步骤如下：

（1）供试品溶液的制备：酒精含量体积分数为42%的竹叶青成品酒45℃水浴锅浓缩至低于1mL，所得浸膏用质量浓度为70%的乙醇溶液溶解后定容至1ml，0.22μm微孔滤膜过滤，即得供试品溶液；

（2）供试品溶液的测定：将供试品溶液注入UPLC-Q-TOF-MS超高效液相色谱-四级杆-飞行时间串联质谱仪；

液相条件如下：色谱柱：Waters Acquity UPLC HSS T3，2.1 mm×100 mm，1.7µm；进样量：5μL；流速：0.3mL/min；柱温：40℃；流动相包括：A：0.1%甲酸水溶液，B：乙腈；梯度洗脱：0-1min，2%-5%B；1-7min，5-10%B；7-15min，10-40%；15-25min，40-95%B；25-27min，95%B；27-27.5min，5%B；27.5-29min，5%B；

质谱条件如下：Full MS；离子源：ESI；质谱条件：电喷雾离子源采用正、负离子模式进行数据采集，雾化气为N₂，锥孔气为N₂；正离子模式参数：喷雾电压ISVF：5500 V，雾化器温度TEM：550℃，气帘气CUR：35psi，辅助气GS1、GS2：55psi；裂解电压DP：80V，碰撞能量CE：30eV，碰撞电压差CES：15eV；

负离子模式参数：喷雾电压ISVF：-4500 V，雾化器温度TEM：550℃，气帘气CUR：35psi，辅助气GS1、GS2：55psi；裂解电压DP：-80V，碰撞能量CE：-30eV，碰撞电压差CES：15 eV；质荷比扫描范围m/z 50~1500Da；其中：1 psi≈6.895 kPa；

（3）数据处理：将采集到的原始质谱数据运用SciexPeakView软件进行峰匹配分析及碎片分析等处理；建立对应的正负离子模式处理方法：workflow项下勾选Quantitation andtargeted identification；Components项下点击import勾选import components from alibrary database；设置正/负离子模式；Flagging Rules项下勾选Mass Error、%Difference lsotope Ratio和Library Hit Score，并分别设置参数为60%、20%、20%后保存方法；①搜索在线数据库：将采集到的原始质谱数据和对应的正负离子模式处理方法导入SCIEX OS-Q -AnaLyst数据处理软件，与中药化学成分在线数据库进行计算匹配，偏差为5ppm，根据保留时间、最大质荷比及二级碎片离子进行鉴定；将化合物名称、保留时间、分子式、质荷比、以及对应的二级离子碎片和误差进行收集；②自建库：通过文献查阅收集竹叶青酒中中药化学成分的分子式、最大质荷比、二级碎片离子等信息，同样将采集到的原始质谱数据和对应的正负离子模式处理方法导入SCIEX OS-Q -AnaLyst数据处理软件，与自建库进行计算匹配，根据保留时间、最大质荷比及二级碎片离子进行鉴定；

（4）分析结果：依据文献报道和SCIEX OS-Q -AnaLyst软件处理结果，结合色谱保留行为、分子量信息以及质谱裂解规律，对竹叶青酒化学成分进行快速识别鉴定。