[发明专利]一种具有抗原双捕获功能的聚合物囊泡及其制备方法和应用

说明书

本发明公开了一种具有抗原双捕获功能的聚合物囊泡及其制备方法和应用，该方法为将PCL‑PEG‑PCL和疏水性IMQ溶于有机溶剂，去除有机溶剂形成薄膜；将薄膜干燥后进行水化，加入碳酸氢钠混匀，进行超声处理并透析，收集透析后溶液；将DOTAP、DSPE‑PEG2K‑Mal、DSPE‑PEG5K‑Mannose和MPLA溶于有机溶剂，形成薄膜，再将透析后溶液加入薄膜中水化；将水化后的混合物混匀，在冰浴条件下超声处理；本发明制备得到的聚合物囊泡具有抗原捕获作用，同时释放IMQ，能够促进BMDCs的活化和成熟以及溶酶体逃逸，有效激活CD4⁺T细胞和CD8⁺T细胞细胞免疫能力，产生强大的T细胞杀伤效应，同时促进细胞因子IFN‑γ和TNF‑α的产生，并产生长期免疫记忆效果。

技术领域

本发明涉及抗肿瘤技术领域，具体涉及一种具有抗原双捕获功能的聚合物囊泡及其制备方法和应用。

背景技术

恶性肿瘤仍然是目前亟待解决的难题，给人类的生命健康带来极大地威胁，常见的治疗手段包括手术、化疗和放疗，这三种治疗方法对于改善晚期癌症病人的生命质量以及延长患者的生命时间有较大的效果，然而，对于癌症的治愈带来严峻的挑战，与此同时，给患者带来无法承受的副作用。因此，人们一直在寻找新兴的治疗手段，肿瘤免疫疗法是恶性肿瘤治疗的突破口。在2016年2月4日的恶性肿瘤的研究进展年报中，免疫疗法被美国临床肿瘤学会(American Society of Clinical Oncology，ASCO)评为2015年恶性肿瘤研究的最大进展。肿瘤的免疫疗法通过激发机体的先天性免疫和适应性免疫系统，激活机体的免疫系统，从而抗肿瘤的免疫反应。但是目前的免疫疗法效果差。

光热疗法在肿瘤治疗中发挥重要作用，具有毒副作用小、有效杀伤肿瘤，通过温度和产生活性氧杀伤肿瘤，会产生肿瘤相关抗原从而激活机体的免疫反应，同时会上调热休克蛋白，增加肿瘤的CRT暴露，促进细胞因子的分泌来杀伤肿瘤细胞和激起机体的免疫效应，从而达到抗肿瘤效应。吲哚菁绿(ICG)是FDA批准用于近红外成像的光敏剂，具有毒性小和在700-820nm具有较强的近红外吸收的特点。但是游离的ICG具有易被降解、光不稳定性和光热效果差。

有鉴于此，特提出本发明。

发明内容

本发明的目的在于提供一种具有抗原双捕获功能的聚合物囊泡及其制备方法和应用，本发明具有抗原双捕获功能的聚合物囊泡中DOTAP和DSPE-PEG2K-Mal发挥抗原捕获作用，同时在肿瘤酸性条件下释放IMQ，能够显著促进BMDCs的活化和成熟，同时促进溶酶体逃逸，有效激活CD4⁺T细胞和CD8⁺T细胞细胞免疫能力，产生强大的T细胞杀伤效应，同时促进细胞因子IFN-γ和TNF-α的产生，并产生长期免疫记忆效果，通过将其用于光热联合免疫治疗能够有效消除近端肿瘤，通过免疫作用抑制远端肿瘤的生长，取得较好的抗肿瘤转移和复发作用。

为了实现本发明的上述目的，特采用以下技术方案：

本发明第一方面提供一种具有抗原双捕获功能的聚合物囊泡的制备方法，所述制备方法包括如下步骤：

(a)将PCL-PEG-PCL和疏水性IMQ溶于有机溶剂，然后去除有机溶剂形成一层均匀薄膜；

(b)将薄膜干燥后进行水化，加入NaHCO₃混匀后，进行超声处理并透析，收集透析后溶液；

(c)将DOTAP、DSPE-PEG2K-Mal、DSPE-PEG5K-Mannose和MPLA溶于有机溶剂中，然后，去除有机溶剂形成一层均匀薄膜，再将透析后溶液加入薄膜中进行水化；

(d)将水化后的混合物混匀后，在冰浴条件下进行超声处理，即得所述具有抗原双捕获功能的聚合物囊泡。