[发明专利]酚类化合物及其制备方法和应用

说明书

本发明涉及酚类化合物及其制备方法和应用，具体涉及山楂果实中的酚类化合物及其制备方法和应用，属于医药技术领域。酚类化合物及其药学上可接受的盐、异构体，所述酚类化合物具有下述式I、式II或式III所示化学结构式，本发明所述化合物是采用硅胶、HP20柱层析、ODS柱层析、HPLC等色谱方法得到的。同时，本发明还公开了上述化合物在制备药物的抗帕金森氏综合症(PD)神经保护活性及其医药用途。本发明制备方法简单，重现性好，纯度高。获得的化合物具有良好的抗PD活性作用。

技术领域

本发明涉及酚类化合物及其制备方法和应用，具体涉及山楂果实中的酚类化合物及其制备方法和应用，属于医药技术领域。

背景技术

帕金森病(Parkinson’s disease，PD)，一种常见的神经系统变性疾病，临床上表现为运动过缓(运动始动和完成迟缓)，僵硬(肌张力增高)，震颤和姿势反射失常，其中的特发性病例是为Parkinson病(PD)，是成年发病的特发性病变。中脑黑质多巴胺能神经元的变性死亡引起纹状体多巴胺能神经元含量显著性减少而致病是其主要的病理性改变。PD在老年人当中多见，平均发病年龄为60岁左右，40岁以下发病的青年帕金森病较少见。我国65岁以上人群PD的患病率大约是1.7％。大部分帕金森病患者为散发病例，仅有不到10％的患者有家族史。导致这一病理改变的确切病因目前仍不清楚，遗传因素、环境因素、年龄老化、氧化应激等均可能参与多巴胺能神经元的变性死亡过程，但已有足够的证据表明氧化应激引起的细胞凋亡增多与多巴胺能神经细胞退行性病变是密切相关的。过氧化氢(H₂O₂)诱导的SH-SY5Y细胞帕金森病模型：H₂O₂对多巴胺神经细胞有损害，在黑质铁离子催化下产生有毒的羟基，受损细胞会使多巴胺能神经元置于氧化应激状态。此前的文献报道称山楂(Crataeguspinnatifida Bge.)中具有多种化学成分，其中发现一些具有较好神经保护活性的酚类化合物。

发明内容

本发明所涉及的酚类化合物是通过对山楂(Crataeguspinnatifida Bge.)果实提取制备获得的，具有较好的神经保护活性。本发明所述酚类化合物是从蔷微科山楂属植物山楂中提取分离得到的酚类化合物。本发明所涉及的化合物及其活性，迄今为止尚未见有专利或文献报道。

酚类化合物及其药学上可接受的盐、异构体，所述酚类化合物具有下述式I、式II或式III所示化学结构式，

本发明所述酚类化合物及其药学上可接受的盐、异构体，所述酚类化合物是从山楂果实中提取所得的提取物。

本发明的另一目的是提供上述酚类化合物的制备方法。

一种酚类化合物的制备方法，包括下述工艺步骤：

S1，将山楂果实使用乙醇提取浓缩后得浸膏，将所得浸膏依次采用乙酸乙酯和正丁醇萃取，乙酸乙酯部分和正丁醇部分经硅胶柱色谱，以二氯甲烷-甲醇系统100:1～5:1进行等度梯度洗脱，共收集到4个馏分I～IV；

S2，馏分I经HP20柱色谱，以乙醇-水系统进行梯度洗脱，得2个馏分A1和A2；

S3，馏分A1和A2分别经ODS柱分离，以乙醇-水系统进行梯度洗脱，合并收集得到5个馏分Fr.1，Fr.2，Fr.3，Fr.4，Fr.5；

S4，Fr.3，Fr.4经硅胶柱分离，经二氯甲烷-甲醇系统进行梯度洗脱，其中洗脱得到的馏分经制备型HPLC，以CH₃OH-H₂O洗脱，再经过半制备型HPLC色谱，以CH₃CN-H₂O洗脱，分离纯化得到1，化合物2，化合物3。

优选地，所述步骤S1中，取干燥的山楂果实以70％工业乙醇回流提取3次，每次4h，合并提取液浓缩得到浸膏。