[发明专利]制备壳聚糖稳定的皮克林乳液及喹乙醇印迹微球的方法

说明书

制备壳聚糖稳定的皮克林乳液及喹乙醇印迹微球的方法，以及该微球在动物源食品中喹乙醇及其代谢物提取、净化及富集中的应用。首次以壳聚糖作为皮克林乳液稳定剂制备了一种新型的水包油皮克林乳液，为壳聚糖在食品安全检测领域中的应用提供了一种新的借鉴。通过结合皮克林乳液技术与分子印迹技术制备了一种尺寸均匀、形貌规整、孔穴丰富、选择性好的喹乙醇印迹吸附材料。本发明中所用制备方法简单、成本低廉，制备的吸附材料适用于分离柱中的填充吸附材料，用于高效净化、富集食品中痕量残留的喹乙醇及其代谢物，应用前景巨大。

技术领域

本发明属于材料制备技术及动物源性食品中痕量污染物残留检测技术领域，具体涉及一种新型纳米粒子稳定的Pikering即皮克林乳液的聚合方法，以壳聚糖为皮克林（Pikering）乳液稳定剂制备用于净化、富集食品中喹乙醇及其代谢物残留的喹乙醇分子印迹微球的方法。

背景技术

喹乙醇(Olaquindox)属于喹噁啉类药物，是人工合成的非抗生素类抗菌促生长剂，因其可以改变动物肠道菌群、促进蛋白质同化，被广泛用于猪、牛、鸡、羊的促进生长，抗菌治病和水生动物疾病的防治。在过去的几十年里，喹乙醇在渔业和畜牧业中的滥用非常普遍，导致其残留在动物源食品及水体中。研究发现，喹乙醇具有生物毒性，能造成染色体变异，动物受刺激时，会应激出血引发死亡，大量喹乙醇会在动物体内富集，具有蓄积毒性，在动物体内蓄积到一定程度时会对动物和人产生致畸、致癌、致突变的“三致”作用，对消费者健康构成严重威胁，成为当今食品安全中较为严峻的问题。

常用的喹乙醇的检测方法有酶联免疫吸附法、高效液相色谱法、电化学检测法、生物传感器、荧光检测法和高效液相色谱-质谱法等。由于食品样品基质较为复杂，在提取和净化喹乙醇及其代谢物残留时常需进行预处理步骤。常用的预处理方法有固相萃取法、基质分散固相萃取法和固相微萃取法等。这些预处理方法的效率主要取决于吸附剂在萃取装置中的性能，因此研发高效吸附目标物的吸附材料及高灵敏度的检测方法是必要的。

分子印迹技术基于功能单体与模板分子之间多种作用力实现结合，进而加入交联剂和引发剂，通过自由基聚合的方式，制备高度交联的聚合物骨架，经索氏提取洗脱去除模板后，在聚合物骨架中留下特异性识别的孔穴和位点。分子印迹聚合物具有机械／化学稳定性高、选择性好、可重复使用等显著优点。

目前有关分子印迹吸附材料的研究亟待解决，早期使用常规方法制备的分子印迹聚合物，合成过程复杂、合成的材料形貌差，多为块状聚合物，且孔隙率低，吸附下限高等缺点。

发明内容

发明目的：

本发明针对传统的分子印迹材料存在合成过程复杂、合成材料形貌差、孔隙率低以及吸附下限高等缺点，提供了一种基于壳聚糖纳米粒子稳定的皮克林乳液制备喹乙醇及其代谢物分子印迹微球方法及应用。

技术方案：

制备壳聚糖稳定的皮克林乳液的方法，该乳液的制备步骤如下：

(1)将壳聚糖溶解于蒸馏水中；

(2)将模板分子喹乙醇、功能单体甲基丙烯酸、交联剂乙二醇二甲基丙烯酸酯加到致孔剂甲苯中，混匀后加入引发剂偶氮二异丁腈，搅拌使其溶解；

(3)将步骤(2)得到的溶液加入到步骤(1)所得到的溶液中，使用均质器均质，直至形成稳定的皮克林乳液。

在步骤(1)中，将壳聚糖溶解到蒸馏水中进行超声处理，超声功率为200~300W，时间为5~15分钟；壳聚糖与蒸馏水的质量体积比为：1~10mg：1mL。

在步骤(2)中，模板分子喹乙醇的摩尔质量：功能单体甲基丙烯酸的摩尔质量：交联剂乙二醇二甲基丙烯酸酯的摩尔质量：致孔剂甲苯的体积比为：1mmoL：(3~6)mmoL：(4~8)mmoL：(0.5~1)mL；

引发剂与模板分子的质量摩尔比为：40~50mg：1mmoL。