[发明专利]一株枯草芽胞杆YX72及其在防治烟草镰刀菌根腐病和促生长中的应用

说明书

本发明涉及微生物应用领域，具体涉及一种枯草芽胞杆YX72及其在防治烟草镰刀菌根腐病和促生中的应用，包括枯草芽胞杆YX72的筛选和分析测定方法，枯草芽胞杆YX72在防治烟草镰刀菌根腐病和促生长中的应用。本发明筛选出一种烟草尖孢镰刀菌和茄病镰刀菌具有良好的拮抗作用，对多种常见烟草病原真菌抑菌具有较强的抑制效果，对烟草种子萌发及促生作用效果好，对靶标病原菌尖孢镰刀菌的菌丝生长具有显著抑制作用，对镰刀菌根腐病的盆栽防效及生防菌促生作用效果好的枯草芽胞杆YX72及其在防治烟草镰刀菌根腐病和促生中的应用，使得本发明具有广泛的市场前景。

技术领域

本发明涉及微生物应用领域，具体涉及一种枯草芽胞杆YX72及其在防治烟草镰刀菌根腐病和促生中的应用。

背景技术

病害一直是影响烟草生产的重要因素之一，近年来随着气候条件、土壤微生态和耕作制度等变化，烟草镰刀菌根腐病已成为危害烟草的重要根茎类真菌病害(李小杰等，2022)，引起烟草镰刀菌根腐病的主要病原是尖孢镰刀菌(Fusarium oxysporum)和茄病镰刀菌(Fusarium solani)(邱睿等，2018)。目前防治作物镰刀菌根腐病的主要策略是利用抗病品种和化学防治，但抗病种植资源有限、选育抗病品种周期长，化学防治主要是通过化学杀菌剂来杀死或抑制病原菌生长达到防治效果，长期使用化学药剂会造成环境污染、农药残留、病原菌产生抗药性等问题(邱睿等2016)，长期大量使用化学农药还可加速病菌群体遗传结构生理分化和变异(程海洋等，2021)。近年来，植物病害的防治已由化学防治逐渐向生物防治转变，生防微生物的应用成为防治植物病虫害的重要手段，利用拮抗菌防治烟草病害已有相关报道(赵誉强等，2022)。针对烟草镰刀菌根腐病生防菌研究较多的是木霉菌(Trichoderma spp.)。

2021年从豫中烟区烟草根际土壤中分离筛选出对烟草尖孢镰刀菌具有拮抗作用的棘孢木霉(Trichoderma asperellum)Tr-0111；2015年通过平板稀释法从洛阳地区烟田土壤中获得对尖孢镰刀菌具有较好拮抗效果的哈茨木霉(Trichoderma harzianum)、棘孢木霉、深绿木霉(Trichoderma atroviride)和毛簇木霉(Trichoderma viride)；2020年通过平板对峙筛选出对烟草镰刀菌根腐病病原菌具拮抗作用的两种木霉菌，粗壮木霉(Trichoderma strigosum)和钩状木霉(Trichoderma hamatum)；2019年从烟草根际土壤中分离筛选出对烟草尖孢镰刀菌具有较强抑制作用的放线菌金黄垂直链霉菌(Streptomycesaureoverticillatus)； 2020年通过平板对峙试验结果表明贝莱斯芽孢杆菌(Bacillusvelezensis)和枯草芽孢杆菌 (Bacillus subtilis)对木香尖孢镰刀菌的抑菌率均达到66％以上；2019年研究发现生防细菌 JK2015对菌尖孢镰刀菌茄子专化型(Fusariumoxysporum f.sp.melongenae，Fom)和尖孢镰刀菌古巴专化型4号小种(Fusariumoxysporum f.sp.cubense race 4，Foc4)抑菌效果显著，抑菌率达到52％以上；由此可见，目前关于烟草镰刀菌根腐病生防细菌相关研究相对较少，为筛选出对烟草镰刀菌根腐病病原菌有高效拮抗效果的生防细菌，本发明以豫中和豫西烟区健康烟株根际土壤为分离来源，利用平板对峙法对分离菌株的拮抗效果进行筛选，对抑菌率较高的菌株进行抑菌谱测定、防病促生作用测定、分类鉴定以及生防机理探索，以研发烟草为烟草镰刀菌根腐病生物防治药剂。

发明内容

本发明提供枯草芽胞杆YX72及其在防治烟草镰刀菌根腐病和促生中的应用，用于克服现有技术中缺陷。

本发明采用的技术方案为：一株枯草芽胞杆YX72，所述的枯草芽胞杆YX72的筛选和分析测定方法的操作包括以下步骤：

步骤一：采集健康烟株根际土壤样本；

步骤二：进行微生物分离，采用稀释涂布平板法，从土壤中分离纯化细菌菌株，并计算抑菌率；

步骤三：筛选拮抗菌株，利用平板对峙培养法，以烟草尖孢镰刀菌和茄病镰刀菌为靶标病原菌，筛选拮抗细菌；