[发明专利]一株枯草芽胞杆YX72及其在防治烟草镰刀菌根腐病和促生长中的应用在审
申请号: | 202210398551.2 | 申请日: | 2022-04-15 |
公开(公告)号: | CN114774279A | 公开(公告)日: | 2022-07-22 |
发明(设计)人: | 邱睿;白静科;董宁禹;刘东升;李小杰;李成军;赵均;陈玉国;苏新宏;宋瑞芳;房文祎;李彩虹;张盈盈;李淑君;陈彦春;杨晋燕 | 申请(专利权)人: | 河南省农业科学院烟草研究所 |
主分类号: | C12N1/02 | 分类号: | C12N1/02;C12Q1/04;C12Q1/18;A01N63/22;A01P3/00;C12R1/125 |
代理公司: | 郑州意创知识产权代理事务所(特殊普通合伙) 41138 | 代理人: | 张江森;张燕红 |
地址: | 461000 河南省*** | 国省代码: | 河南;41 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 枯草 芽胞杆 yx72 及其 防治 烟草 镰刀 菌根 生长 中的 应用 | ||
1.一株枯草芽胞杆YX72,其特征在于:所述的枯草芽胞杆YX72的筛选和分析测定方法的操作包括以下步骤:
步骤一:采集健康烟株根际土壤样本;
步骤二:进行微生物分离,采用稀释涂布平板法,从土壤中分离纯化细菌菌株;
步骤三:筛选拮抗菌株,利用平板对峙培养法,以烟草尖孢镰刀菌和茄病镰刀菌为靶标病原菌,筛选拮抗细菌,并计算抑菌率;
步骤四:拮抗菌株的抑菌谱测定,采用平板对峙培养法,进行生防菌株对多种常见烟草病原真菌抑菌试验,从而筛选出具有较强抑制作用且抑菌谱广的拮抗菌株;
步骤五:拮抗菌株对烟草种子萌发及促生作用测定,采用培养皿滤纸保湿法,测量种子萌发及计算增长率;
步骤六:拮抗菌发酵滤液的抑菌活性测定,制备拮抗菌发酵滤液,采用平板打孔法测试生防菌发酵滤液的抑菌作用,测定拮抗菌发酵滤液对病原菌孢子萌发的影响作用;
步骤七:拮抗菌挥发性化合物的抑菌活性测定,计算相对抑菌率;
步骤八:拮抗细菌的鉴定,结果显示菌株YX72的16S rDNA基因序列与枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)YD28(KY887763.1)等的序列相似性达到99%,且位于同一进化分支;
步骤九:拮抗细菌对镰刀菌根腐病的盆栽防效及生防菌促生作用的测定,挑出大小一致的健壮烟苗,将烟苗根部浸泡于在拮抗细菌悬浮液中,进行拮抗菌悬浮液灌根,设置对照组,根据中华人民共和国国家标准(GB/T23222-2008)中烟草根茎类病害分级及调查方法调查发病情况,计算发病情况及生防菌防效。
2.根据权利要求1所述的枯草芽胞杆YX72在防治烟草镰刀菌根腐病和促生长中的应用。
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