[发明专利]生物标志物在HBV相关肝癌诊断及预后中的应用

说明书

本发明提供一种检测lncRNA的表达水平的试剂在制备诊断HBV相关肝癌或预测HBV相关肝癌预后的产品中的应用，所述lncRNA为AC005332.5、ELF3‑AS1和LINC00665，该标志物组合具有高特异性和灵敏度，能够作为HBV相关肝癌的有效诊断标记，并且其表达水平与HBV相关肝癌分期、分级及总体存活率相关，可应用于HBV相关肝癌的预后判断。

技术领域

本发明涉及医学生物检测技术领域，具体地说，涉及血清标志物在HBV相关肝癌的诊断及预后判断中的应用。

背景技术

原发性肝细胞肝癌（Hepatocellular carcinoma，HCC，以下简称肝癌）是临床最常见的恶性肿瘤之一，近年来其致死率已跃居恶性肿瘤中的第三位，严重威胁着人类的生命健康。乙型肝炎病毒（hepatitis B virus，HBV）被认为是肝癌进展的关键危险因素，甚至是主要的病因。虽然治疗手段如手术、移植和射频消融术有了进步，但由于肿瘤的高侵袭性和复发率，HBV相关的肝癌患者的总体生存率仍较低。且对于大多数HBV相关的肝癌患者，在诊断时已经进展到中晚期，已出现局部肿瘤侵犯血管，及淋巴结和远处转移，丧失手术机会。目前，组织活检和病理检查是肝癌诊断的“金标准”，然而由于其有创性，临床应用有限。而临床上使用最广泛的肝癌血清标志物是AFP，但是随着AFP阴性患者的增多，肝癌患者漏检增多，直接影响肝癌患者的早期诊断和预后评价。因此寻找更有效的、敏感的HBV相关的肝癌诊断和预后相关的新型无创标志物具有重要意义。

长链非编码RNA（Long non-coding RNA，lncRNA）是长度超过200个核苷酸的非编码RNA，在基因组转录过程中广泛存在，曾被认为不具有任何生物学功能，作为RNA聚合酶II转录的副产物，被称为是基因组转录的“暗物质”，但随着这些年以来分子生物学技术的不断发展和进步，现有越来越多的研究发现，这些之前所谓的基因组“暗物质”可调控细胞分化、细胞凋亡等多种生物学过程，并在癌症的发生发展中发挥重要作用。而lncRNA与肿瘤之间关系的研究多使用的组织标本。组织标本的获取为有创过程，获取病变部位不一定准确，不适合早期诊断，也不适用于高危人群的筛查。血清标本采集简便，创伤性小，而且可以同时获得多个肿瘤相关指标。因此可以研究血液标本中lncRNA与肿瘤发生发展的关系。由于肝癌的发生发展过程中涉及复杂的病理改变，因此进一步探索lncRNA与HBV相关肝癌的关系，建立lncRNA分子联合检测模型对了解HBV相关肝癌的发生发展及诊断预后具有重大意义。

发明内容

为了克服现有技术的缺陷，本申请发明人经过研究，从大批的癌症标志物中筛选得到了可潜在应用于HBV相关肝癌诊断及预后判断的标志物组合，所述标志物组合是AC005332.5、ELF3-AS1和LINC00665。本发明惊奇地发现，该标志物组合具有高特异性和灵敏度，能够作为HBV相关肝癌的有效诊断标记，并且其表达水平与HBV相关肝癌分期、分级及总体存活率相关，可应用于HBV相关肝癌的预后判断。

本发明提供如下技术方案：

本发明提供了一种诊断HBV相关肝癌或预测HBV相关肝癌预后的产品，所述产品包括检测AC005332.5、ELF3-AS1和LINC00665的表达水平的试剂。

作为本发明优选的实施方案，所述所述产品包括通过PCR、原位杂交、或高通量测序平台检测AC005332.5、ELF3-AS1和LINC00665表达水平的试剂。

作为本发明优选的实施方案，所述试剂包括特异性针对所述AC005332.5、ELF3-AS1和LINC00665的探针或引物。

进一步，所述引物序列为：

所述AC005332.5的正向引物为AGAACCCTGGACCCTAGCATTGG（SEQ ID NO 1）；

所述AC005332.5的反向引物为TAGCCACTCGCACATCCTCCTC（SEQ ID NO 2）；