[发明专利]一种海胆状磁珠的制备方法及其在核酸提取中的应用

权利要求书

1.一种海胆状磁珠的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

S1：单分散二氧化硅微球的制备：首先制备出单分散二氧化硅纳米球；

S2：磁性二氧化硅微球的制备：以Fe²⁺/Fe³⁺为原料，采用简单的共沉淀法将磁性Fe₃O₄沉积在二氧化硅微球表面；

S3：海胆状磁珠的制备：将磁珠二氧化硅微球表面进行硅基化修饰。

2.根据权利要求1所述的一种海胆状磁珠的制备方法，其特征在于，所述的单分散二氧化硅微球的制备，包括以下步骤：

a：将无水乙醇、去离子水、碱源与硅源分别加入到圆底三口烧瓶中，各药品质量比为(70～85％)：(5～15％)：(0.1～2％)：(0.1～2％)，在30～50℃下搅拌1.0～2.0h；

b：将十六烷基三甲基溴化铵与硅源继续加入到体系中，表面活性剂与硅源占溶液总质量为0.1～0.5％和1.0～3.0％，持续搅拌12～24h，即可得到单分散的二氧化硅纳米球；

c：将二氧化硅纳米球、氨水与三氨丙基三乙氧基硅烷分散于无水乙醇中，各药品质量比为(0.5～5.0％)：(0.5～5.0％)：(90～95％)，60～80℃下搅拌6.0～12.0h，即可得到氨基改性的二氧化硅微球。

3.根据权利要求1所述的一种海胆状磁珠的制备方法，其特征在于，所述的磁性二氧化硅微球的制备，包括以下步骤：

a：将改性的二氧化硅纳米球、Fe²⁺与Fe³⁺分散于去离子水中，各药品质量比为(0.5～5.0％)：(0.1～0.5％)：(0.1～0.5％)：100，常温下搅拌1.0h；

b：将氨水逐滴加入到反应体系中，氨水占溶液总质量比为1～5％，滴加完成后，升温至60～80℃下搅拌6.0～12.0h，即可得到磁性二氧化硅微球。

4.根据权利要求1所述的一种海胆状磁珠的制备方法，其特征在于，所述的海胆状磁珠的制备，包括以下步骤：

a:将磁性二氧化硅微球、氨水分散于去离子水与无水乙醇中，各药品质量比为(0.5～5.0％)：(0.5～5％)：(60～75％)：(20～25％)；

b:将硅酸四乙酯逐滴加入到反应，硅酸四乙酯占溶液总质量比为1～5％，滴加完成后，持续搅拌6.0～12.0h，即可得到海胆状磁珠。

5.根据权利要求1所述的一种海胆状磁珠的制备方法，其特征在于，所述S3中，海胆状磁珠的粒径为100～500nm。

6.海胆状磁珠在核酸提取中的应用，其特征在于，根据权利要求1-5所述的海胆状磁珠的制备方法制得的海胆状磁珠，包括以下步骤：

a:病毒核酸提取：将海胆状磁珠充分混合均匀后，加入到磁珠法核酸提取预分装试剂盒中，然后加入一定的样本，使用全自动核酸提取仪进行提取，提取完成后将核酸模板加入到RT-PCR试剂盒中进行扩增实验；

b:全血基因组提取：将海胆状磁珠充分混合均匀后，加入到磁珠法核酸提取预分装试剂盒中，然后加入一定的样本，使用全自动核酸提取仪进行提取，提取完成后使用微量紫外分光光度计对核酸浓度与纯度进行测试。