[发明专利]特异性胸腺淋巴细胞损伤以及再生模型及其构建方法

说明书

本发明涉及疾病动物模型技术领域，具体涉及特异性胸腺淋巴细胞损伤以及再生模型及其构建方法。特异性胸腺淋巴细胞损伤以及再生模型的构建方法，包括以下依次进行的步骤：培养转基因斑马鱼的受精卵获得待处理幼鱼；所述转基因斑马鱼用于表达硝基还原酶，所述硝基还原酶的基因的表达受coro1a基因的启动子调控；使用2mM甲硝唑处理待处理幼鱼，获得甲硝唑处理后幼鱼；清洗所述甲硝唑处理后幼鱼，获得所述特异性胸腺淋巴细胞损伤以及再生模型。本方案解决了现有技术中缺少用于淋巴细胞再生和免疫系统恢复研究的胸腺损伤模型动物模型的技术问题，为获得性免疫系统发生损伤下，免疫系统恢复情况研究以及相关药物筛选创造了条件。

技术领域

本发明涉及疾病动物模型技术领域，具体涉及特异性胸腺淋巴细胞损伤以及再生模型及其构建方法。

背景技术

T淋巴细胞在免疫系统中发挥重要作用，其表达的受体能够识别多种抗原，维持免疫记忆和自身耐受，在抗感染、抗肿瘤和免疫调节方面发挥关键作用。胸腺作为机体的淋巴器官，是供应获得性免疫系统中T淋巴细胞来源的重要场所，在人体免疫系统中处于中枢地位。近年来，在放射线照射、服用抗癌药物、细菌或病毒感染及DNA损伤情况下，胸腺器官损伤、淋巴细胞减少症和细胞免疫缺陷病等病例出现急剧增加。此外，胸腺易受肾上腺、甲状腺、性腺、松果体等腺体分泌激素的影响，导致T淋巴细胞减少，胸腺急性萎缩。随着年龄的增长，胸腺组织逐渐萎缩，T淋巴细胞数量显著减少，胸腺微环境改变，其相关激素浓度明显下降，使得与老龄相关疾病如癌症、自身免疫病及各种传染病相继出现。这些并发症降低了宿主重构外周T淋巴细胞库并对新抗原作出反应的能力，从而免疫功能加重受损。因此，研究T淋巴细胞在损伤的情况下机体的应答以及损伤修复机制，对如何更好的促进T淋巴细胞再生和免疫系统恢复显得尤为重要。

动物模型在研究疾病发生发展机制中起到了非常重要的作用，但是现有技术中仍然缺少能够用于上述研究的胸腺损伤动物模型。虽然有文献报道在小鼠体内利用地塞米松、内毒素、辐射处理或提高糖皮质激素水平都会引发T淋巴细胞发生凋亡、胸腺退化萎缩，以上述手段实现胸腺组织损伤模型的构建。但基于小鼠作为模式生物的胸腺细胞消融模型存在体内受精、发育过程观察困难、繁殖力弱等问题，很大程度上阻碍了对淋巴细胞损伤后修复再生机制和药物筛选研发的进一步探究。由于研究模型的缺陷，导致无法对获得性免疫系统发生损伤下的免疫系统恢复情况进行有效研究。

发明内容

本发明意在提供特异性胸腺淋巴细胞损伤以及再生模型的构建方法，以解决现有技术中缺少用于T淋巴细胞再生和免疫系统恢复研究的胸腺损伤模型动物模型的技术问题。

为达到上述目的，本发明采用如下技术方案：

特异性胸腺淋巴细胞损伤以及再生模型的构建方法，其特征在于，包括以下依次进行的步骤：

S1：培养转基因斑马鱼的受精卵获得待处理幼鱼；所述转基因斑马鱼用于表达硝基还原酶，所述硝基还原酶的基因的表达受coro1a基因的启动子调控；

S2：使用2mM甲硝唑处理待处理幼鱼，获得甲硝唑处理后幼鱼；

S3：清洗所述甲硝唑处理后幼鱼，获得所述特异性胸腺淋巴细胞损伤以及再生模型。

本方案还提供了一种根据特异性胸腺淋巴细胞损伤以及再生模型的构建方法获得的斑马鱼模型。

本方案的原理及优点是：