[发明专利]一种细胞色素P450 BM3突变酶及其在生物催化合成对羟基联苯中的应用在审
申请号: | 202210373930.6 | 申请日: | 2022-04-11 |
公开(公告)号: | CN114672470A | 公开(公告)日: | 2022-06-28 |
发明(设计)人: | 魏有福 | 申请(专利权)人: | 湖北中农华威生物工程有限公司 |
主分类号: | C12N9/04 | 分类号: | C12N9/04;C12N15/53;C12N15/70;C12N1/21;C12P7/22;C12R1/19 |
代理公司: | 武汉科皓知识产权代理事务所(特殊普通合伙) 42222 | 代理人: | 江慧 |
地址: | 435400 湖北省黄冈*** | 国省代码: | 湖北;42 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 细胞 色素 p450 bm3 突变 及其 生物 催化 成对 羟基 联苯 中的 应用 | ||
1.一种细胞色素P450 BM3突变酶,其特征在于,所述细胞色素P450 BM3突变酶为在野生型细胞色素P450BM3单加氧酶的氨基酸序列的第87位或/和第267位中进行了氨基酸突变,具体包括:
A、所述细胞色素P450 BM3突变酶为单一位点的点突变,所述点突变包括:E267V或者F87G;
B、或者所述细胞色素P450 BM3突变酶为两个位点的突变,为E267V和F87G。
2.根据权利要求1所述的一种细胞色素P450 BM3突变酶,其特征在于,编码所述细胞色素P450 BM3突变酶的核苷酸序列如SEQ ID NO:2或SEQ ID NO:3所示。
3.一种编码权利要求1-2任一项所述细胞色素P450 BM3突变酶的核酸分子。
4.根据权利要求3所述的核酸分子,其特征在于,所述核酸分子的核苷酸序列如SEQ IDNO:2或SEQ ID NO:3所示。
5.一种细胞色素P450 BM3突变酶表达载体,其特征在于,所述表达载体包含有所述的核酸分子。
6.一种包含权利要求5所述表达载体的重组菌或工程化细胞系。
7.一种权利要求1-2任一项所述的细胞色素P450 BM3突变酶或权利要求3-4任一项所述的核酸分子或权利要求5所述表达载体或权利要求6所述的重组菌或工程化细胞系在生物催化合成对羟基联苯中的应用。
8.一种催化联苯合成对羟基联苯的方法,其特征在于,所述方法包括:以联苯为底物,采用权利要求1-2任一项所述细胞色素P450 BM3突变酶催化合成产物对羟基联苯。
9.根据权利要求8所述的方法,其特征在于,所述方法具体包括:在缓冲反应液中,加入权利要求1-2任一项所述细胞色素P450 BM3突变酶,后加入底物联苯和NADPH混匀进行生物催化反应,经分离,获得对羟基联苯。
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