[发明专利]一种提高虫草素含量的蛹虫草菌培养基组合物、液体发酵方法及虫草素制备方法在审
申请号: | 202210370200.0 | 申请日: | 2022-04-09 |
公开(公告)号: | CN114591847A | 公开(公告)日: | 2022-06-07 |
发明(设计)人: | 金李洁;李肖娟;李其 | 申请(专利权)人: | 杭州雪域生物技术有限公司 |
主分类号: | C12N1/14 | 分类号: | C12N1/14;C12P19/40;C12R1/645 |
代理公司: | 合肥东邦滋原专利代理事务所(普通合伙) 34155 | 代理人: | 王天马 |
地址: | 311200 浙*** | 国省代码: | 浙江;33 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 提高 虫草 含量 培养基 组合 液体 发酵 方法 制备 | ||
1.一种提高虫草素含量的蛹虫草菌培养基组合物,其特征在于,所述蛹虫草菌培养基组合物包括黄芪药渣、青枣粉、破壁刀豆粉、菊花花粉、石膏、硫酸镁。
2.根据权利要求1所述的蛹虫草菌培养基组合物,其特征在于,所述蛹虫草菌培养基组合物还包括2,4-D。
3.根据权利要求1所述的蛹虫草菌培养基组合物,其特征在于,按重量份数计,所述黄芪药渣为5~15份、所述青枣粉20~30份、所述破壁刀豆粉为6~16份、所述菊花花粉为0.3~1份、所述石膏为0.6~1份、所述硫酸镁为0.3~1份。
4.根据权利要求2所述的蛹虫草菌培养基组合物,其特征在于,按重量份数计,所述黄芪药渣为8~12份、所述青枣粉23~27份、所述破壁刀豆粉为9~11份、所述菊花花粉为0.3~1份、所述石膏0.6~1份、所述硫酸镁为0.3~1份和所述2,4-D为0.0006~0.0010份。
5.根据权利要求2所述的蛹虫草菌培养基组合物,其特征在于,按重量份数计,所述黄芪药渣为10份、所述青枣粉25份、所述破壁刀豆粉为10份、所述菊花花粉为0.7份、所述石膏为0.8份、所述硫酸镁为0.7份和所述2,4-D为0.0008份。
6.一种蛹虫草菌丝体液体发酵方法,其特征在于,权利要求1~5所述的蛹虫草菌培养基组合物加蒸馏水补充到规定量,pH6.2~6.8,121℃灭菌15~30min后冷却制得液体培养基,将蛹虫草菌母种接种至所述的液体培养基中进行发酵,在22℃,暗室培养7d后,光下培养,温度23~25℃,通风并搅拌,发酵时间6~10d,将培养好的发酵液过滤或离心3500~8000rpm处理,发酵上清液备用,收集菌丝体,经过洗涤、干燥得到蛹虫草菌丝体。
7.根据权利要求6所述的发酵方法,其特征在于,所述液体发酵温度为24℃,所述发酵时间为8d,所述发酵液离心速度为4000rpm。
8.一种蛹虫草菌丝体虫草素制备方法,其特征在于,将如权利要求6所述的蛹虫草菌丝体粉碎得到菌丝体粉末;常规方法粉碎后,菌丝体粉末与水以1﹕13~1﹕23的比例混合,调节pH值为7~9,水浴85~98℃,搅拌提取3~5h,4000rpm离心取上清液;浓缩所得上清液至原来体积的10~20%,加入30~35%的乙醇,4000rpm离心并收集上清液;离心后的菌丝体残渣按上述提取步骤再提取1~2次,合并上清液;上清液与发酵上清液合并后经过D101大孔树脂层析,解析液经过浓缩干燥得虫草素。
9.根据权利要求8所述的蛹虫草菌丝体虫草素制备方法,其特征在于,所述常规方法粉碎后,菌丝体粉末与水以1﹕18的比例混合。
10.根据权利要求8所述的蛹虫草菌丝体虫草素制备方法,其特征在于,所述水浴为90℃,所述乙醇浓度为33%。
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