[发明专利]一种基于分子标记辅助选择和倍性育种相结合的辣椒多基因聚合种质的培育方法

权利要求书

1.一种基于分子标记辅助选择和倍性育种相结合的辣椒多基因聚合种质的培育方法，其特征在于，包括如下步骤：

1)将包括优异基因的辣椒亲本两两杂交，得到杂交一代种子；

2)将所述杂交一代种子播种，得到杂交一代植株；

3)于所述杂交一代植株盛花期分离小孢子，进行小孢子培育，得到辣椒单倍体植株，经筛选，得到优异基因聚合的辣椒单株；

4)对所述优异基因聚合的辣椒单株进行染色体加倍，获得优异基因聚合的辣椒二倍体植株；

5)将所述优异基因聚合的辣椒二倍体植株经生根培养和种植管理，得到辣椒多基因聚合种质；

所述步骤1)中的辣椒亲本均至少包括一个优异基因；

当所述步骤1)中为两个包括优异基因的辣椒亲本杂交时，两个辣椒亲本分别为抗根结线虫黄果辣味辣椒和红果无辣味辣椒；

所述步骤3)中的筛选包括分子标记辅助筛选；所述优异基因的分子标记包括抗根结线虫Me基因、无辣味at3基因和黄果ccs基因的分子标记；

所述抗根结线虫Me基因分子标记的检测引物为Me-1，所述Me-1的正向引物序列如SEQID No.1所示，所述Me-1的反向引物序列如SEQ ID No.2所示；

所述无辣味at3基因分子标记的检测引物为at3-2，所述at3-2的正向引物序列如SEQIDNo.3所示，所述at3-2的反向引物序列如SEQ ID No.4所示；

所述黄果ccs基因分子标记的检测引物为ccs-3，所述ccs-3的正向引物序列如SEQIDNo.5所示，所述ccs-3的反向引物序列如SEQ ID No.6所示；

所述步骤5)中得到的辣椒多基因聚合种质为抗根结线虫黄果无辣味辣椒。

2.根据权利要求1所述的培育方法，其特征在于，所述步骤1)中的辣椒亲本均为辣椒自交系品种。

3.根据权利要求1所述的培育方法，其特征在于，所述杂交为正反交。

4.根据权利要求1～3任一项所述的培育方法，其特征在于，所述步骤3)中的小孢子为单核靠边期的小孢子。

5.根据权利要求1～3任一项所述的培育方法，其特征在于，所述步骤3)中小孢子培育的培养基以NTh为基础培养基，添加0.5mg/LKT、0.25mg/L 2,4-D、4mg/LAgNO₃、0.2wt.％AC、3wt.％蔗糖、0.7wt.％琼脂，pH值为5.8。

6.根据权利要求1～3任一项所述的培育方法，其特征在于，所述步骤4)中染色体加倍的方法包括：以质量浓度为0.45％的秋水仙素包裹所述辣椒单株的茎尖30h，获得所述优异基因聚合的辣椒二倍体植株。