[发明专利]一种复合制剂LL-37-cGAMP及其制备方法和应用

说明书

本发明涉及一种由人源抗菌肽LL‑37与环二核苷酸Cyclic GMP‑AMP(cGAMP)组成的复合制剂(简称LL‑37‑cGAMP)及其制备方法与应用。所述人源抗菌肽LL‑37序列如ID No.1所示。本发明通过将具有细胞膜穿梭特性的人源抗菌肽LL‑37与cGAMP联合使用制成LL‑37‑cGAMP复合制剂。一方面，LL‑37可以将cGAMP分子高效运载到细胞内，极大地提高了cGAMP免疫激活能力和抗病毒能力(提高了10‑40倍)；另外，LL‑37本身具有良好的抗病毒特性，通过将LL‑37和cGAMP配伍使用，解决了单独的cGAMP或LL‑37抗病毒效果不够理想的缺陷。

技术领域

本发明属于生物制剂领域，具体地说，涉及一种新型的兼具免疫调节和抗病毒功能的复合制剂及其制备方法与应用，尤其是一种利用人源抗菌肽运载生物小分子 cGAMP进行联合免疫治疗和抗病毒防治的复合制剂及其制备方法和应用。

背景技术

近年来cyclic GMP-AMP Synthase(cGAS)-cyclic GMP-AMP(cGAMP)-Stimulatorof Interferon Genes(STING)信号通路的发现是天然免疫领域的重大突破。 cGAS-cGAMP-STING信号通路在机体免疫调节方面发挥着重要作用。机体细胞中存在着一定的DNA损伤反应，当这些DNA被抗原提呈细胞监测到并摄入后，会被cGAS 识别并合成第二信使cGAMP分子。cGAMP结合并活化STING，活化的STING招募 TBK1并激活IRF3，进而迅速诱导I型干扰素及下游基因的表达，最终强效抑杀病毒。由此可见，作为STING的优良激动剂，cGAMP可通过激活机体先天免疫来有效抑杀病毒。但是，人体内天然的cGAMP含量非常有限，因此通过外源补充cGAMP来提高机体免疫力及防治病毒感染极具前景。

尽管外源补充cGAMP是一种优良的调节机体免疫力和抗病毒策略，但由于 cGAMP携带阴离子并且具有高度亲水性，导致cGAMP很难穿透细胞膜进入细胞内激活cGAS-STING先天免疫通路发挥抗病毒作用，这极大地限制了cGAMP的药用潜力和治疗效果。另外，单独的cGAMP抗病毒效果有限，尚难达到理想水平。鉴于上述缺点，开发安全高效、能够提高cGAMP进细胞效率和抗病毒效果的药剂对于改善人类和动物的免疫机能和抗病毒能力具有重要意义。

发明内容

针对目前cGAMP难以穿过细胞膜及单独抗病毒效果不够理想的问题，本发明的目的是提供一种新型的具有免疫调节和抗病毒作用的复合制剂LL-37-cGAMP，以提高 cGAMP进入细胞的效率，同时增强cGAMP的抗病毒效果，并提供其制备方法和应用。

为了实现上述目的，本发明提供了一种新型的免疫调节和抗病毒的复合制剂。

所述复合制剂，其组成包括阳离子抗菌肽LL-37和cGAMP或其类似物。

其中，所述阳离子抗菌肽LL-37的氨基酸序列如ID No.1所示，或该序列经替换、缺失或添加一个或几个氨基酸形成的具有同等功能的氨基酸序列。

所述cGAMP分子结构如式I所示；所述cGAMP的类似物是其它具有类似功能的环二核苷酸(如来源于细菌的3,3-cGAMP、c-di-AMP、c-di-GMP等)或cGAMP分子经微小结构修饰后形成的具有类似功能的小分子。

进一步的，所述复合制剂中cGAMP或其类似物与阳离子抗菌肽LL-37的配比为(0.1-300)mmol∶(1-500)g。

更进一步的，所述复合制剂中cGAMP或其类似物与阳离子抗菌肽LL-37的配比为(1-3)mmol∶(5-40)g。

本发明还提供一种所述复合制剂的制备方法。

本发明所提供的所述复合制剂的制备方法，包括下述步骤：将人源阳离子抗菌肽LL-37与cGAMP或其类似物物理共混即可。