[发明专利]一种靶向H1.4的sgRNA以及H1.4基因编辑方法有效
| 申请号： | 202210346984.3 | 申请日： | 2022-04-01 |
| 公开（公告）号： | CN114657181B | 公开（公告）日： | 2023-08-25 |
| 发明（设计）人： | 李勇;陈荣;陈倩;张洁;段新月;石凡 | 申请（专利权）人： | 安徽大学 |
| 主分类号： | C12N15/113 | 分类号： | C12N15/113;C12N15/10;C12N15/85;C12N5/10;C12N5/09 |
| 代理公司： | 北京壹川鸣知识产权代理事务所(特殊普通合伙) 11765 | 代理人： | 范宇皓 |
| 地址： | 230000*** | 国省代码： | 安徽;34 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 靶向 h1 sgrna 以及 基因 编辑 方法 | ||
【权利要求书】：
1.一种靶向H1.4的sgRNA用于制备治疗肺癌的药物的应用，其特征在于，所述sgRNA基于CRISPR/Cas9基因编辑技术，能够靶向H1.4外显子，并能够与Cas9蛋白共同敲除H1.4基因，所述sgRNA的序列如SEQ ID NO:1所示，即
5’-ACGCGCCGGUGCCCUUGGUC-3’。
2.如权利要求1所述的应用，其特征在于，所述sgRNA的双链DNA模板序列如SEQ ID NO:3 所示，即5’-CACCGGACCAAGGGCACCGGCGCGT-3’和SEQ ID NO:4 所示，即5’-AAACACGCGCCGGTGCCCTTGGTCC-3’。
3.一种组合物用于制备治疗肺癌的药物的应用，其特征在于，所述组合物包括权利要求1-2中任一项中所述的靶向H1.4的sgRNA和Cas9蛋白，所述组合物用于敲除肺癌细胞H1.4基因、调控肺癌细胞EMT进程，从而调控肺腺癌细胞的迁移和侵袭。
4.如权利要求3所述的应用，其特征在于，所述Cas9蛋白是通过px459-hU6-H1.4-sgRNA基因敲除质粒重组表达的。
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