[发明专利]一种新型AAV血清型及其制备方法

权利要求书

1.一种新型AAV血清型，其病毒衣壳蛋白包括VP1、VP2和VP3序列，其特征在于：VP3序列的3’末端为鹿或猪细小病毒序列的AAV VP3序列。

2.一种新型AAV血清型的制备方法，其特征在于：其包括以下步骤：

S1、将鹿或猪细小病毒的VP3序列与AAV病毒的VP3序列进行比对，确定鹿或猪细小病毒序列可插入AAV病毒的VP3的氨基酸序列位点；

S2、将所有病毒外壳蛋白基因序列扩增后，按比例加入，进行无引物PCR反应；

S3、以步骤S2中的PCR反应后的序列为模板进行全长PCR反应，获得目的条带；

S4、将目的条带无缝克隆进入病毒载体质粒，包装新型AAV血清型，得到的新型AAV血清型，新型AAV血清型的VP3序列的3’末端为鹿或猪细小病毒的AAV VP3序列。

3.根据权利要求2所述的新型AAV血清型的制备方法，其特征在于：所述的AAV病毒为AAV2血清型病毒或AAV5血清型病毒。

4.根据权利要求2所述的新型AAV血清型的制备方法，其特征在于：所述的步骤S1中，AAV病毒的VP3序列为AAV2血清型病毒的VP3序列、AAV5血清型病毒的VP3序列，或是AAV2血清型和AAV5血清型的嵌合病毒的VP3序列，即为AAV2.5T序列。

5.根据权利要求2所述的新型AAV血清型的制备方法，其特征在于：步骤S1中，鹿或猪细小病毒的VP3序列与AAV病毒的VP3序列进行比对时，比对其中的同源序列，找出的同源序列位点即为可插入鹿或猪细小病毒序列的氨基酸序列位点。

6.根据权利要求2所述的新型AAV血清型的制备方法，其特征在于：步骤S2中，在病毒外壳蛋白基因序列中插入引物进行引物扩增，扩增后的基因经纯化回收后再混合进行无引物PCR反应。