[发明专利]一种以芳香族羧酸或杂环羧酸为原料生物合成伯胺的方法在审
| 申请号： | 202210316352.2 | 申请日： | 2022-03-29 |
| 公开（公告）号： | CN114854802A | 公开（公告）日： | 2022-08-05 |
| 发明（设计）人： | 刘炜;冯埃生 | 申请（专利权）人： | 广东腐蚀科学与技术创新研究院 |
| 主分类号： | C12P13/00 | 分类号： | C12P13/00;C12N15/31;C12N15/53;C12N15/54;C12N15/70;C12N1/21;C12R1/19 |
| 代理公司： | 哈尔滨市阳光惠远知识产权代理有限公司 23211 | 代理人： | 王志新 |
| 地址： | 510530 广东省*** | 国省代码： | 广东;44 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 芳香族 羧酸 原料 生物 合成 方法 | ||
1.一种以芳香族羧酸或杂环羧酸为原料生物合成伯胺的方法，其特征在于，以芳香族羧酸或杂环羧酸为底物，以基因工程菌为生物催化剂进行发酵反应；所述基因工程菌被敲除DNA结合转录双调节因子arcA，并过表达羧酸还原酶基因nccar、磷酸泛酰巯基乙胺转移酶基因pptase和ω-转氨酶基因oata。
2.根据权利要求1所述的的方法，其特征在于，反应的条件为温度30℃，pH＝7.0，时间至少2小时。
3.根据权利要求1所述的的方法，其特征在于，基因工程菌：底物量之比OD600nm＝10-150：5-60mM。
4.根据权利要求1所述的的方法，其特征在于，所述芳香族羧酸或杂环羧酸为2-吡啶羧酸、糠酸、4-氟苯甲酸、2,4-二氟苯甲酸和2,4-二甲氧基苯甲酸其中任意一个或多个。
5.根据权利要求1所述的的方法，其特征在于，催化反应体系中添加MgSO4、L-丙氨酸、芳香族羧酸或杂环羧酸和缓冲液。
6.根据权利要求5所述的方法，其特征在于，所述芳香族羧酸或杂环羧酸为2-吡啶羧酸、糠酸、4-氟苯甲酸、2,4-二氟苯甲酸和2,4-二甲氧基苯甲酸其中任意一个或多个。
7.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述基因工程菌的出发菌为大肠杆菌K-12MG1655 RARE。
8.根据权利要求7所述的方法，其特征在于，所述大肠杆菌K-12MG1655 RARE为敲除了3个醛酮还原酶基因和3个醇脱氢酶基因的大肠杆菌K-12MG1655；所述醛酮还原酶基因为dkgB基因、yeaE基因和dkgA基因；所述醇脱氢酶基因为yqhD基因、yahK基因和yjgB基因。
9.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述DNA结合转录双调节因子arcA的GeneBank ID为QJZ27444.1；所述羧酸还原酶基因nccar的GeneBank ID为XM_950727.2、磷酸泛酰巯基乙胺转移酶基因pptase的GeneBank ID为CP024090.1和ω-转氨酶基因oata基因的GeneBank ID为CP000758.1。
10.权利要求1-9任一项所述的方法在制备芳香伯胺或杂环伯胺中的领域的应用。
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