[发明专利]一种桦褐孔菌葡聚糖及其制备方法和应用

说明书

本发明公开了一种桦褐孔菌葡聚糖及其制备方法和应用，涉及药物领域；该葡聚糖的结构式如下所示：本发明通过优化提取分离工艺，得到了一种桦褐孔菌葡聚糖，结构测定为一种新的多糖。本发明制备的桦褐孔菌葡聚糖具有很好的抗胰腺癌肿瘤活性，并且本发明制备的桦褐孔菌葡聚糖还可以和盐酸吉西他滨联合应用，对肿瘤具有更优异的抑制效果，二者联用具有协同效果，能够减少化疗药物的用量，降低化疗药物的不良反应。

技术领域

本发明涉及药物领域，特别是涉及一种桦褐孔菌葡聚糖及其制备方法和应用。

背景技术

桦褐孔菌(Inonotus Obliquus)，又称桦树茸，白桦茸，属真菌门、担子菌亚门、层菌纲、非褐菌目、多孔菌科、褐卧孔菌属。16世纪以来，桦褐孔菌就被俄罗斯国家用于各种疾病治疗，经过长期民间摸索，桦褐孔菌被证实对常见慢性疾病，如糖尿病、心脏病等有较好疗效，1955年后俄罗斯就对桦褐孔菌的抗癌特性进行系统研究，发现其对消化系统的癌症有较好的治疗潜力。

胰腺癌是胰腺的外分泌性腺癌，该病的早期诊断十分困难，是胰腺恶性肿瘤中最常见的一种，且恶性程度极高，多数病例发现时已存在远处转移和/或周围器官侵犯，5年生存率低于5％，在恶性肿瘤中国已上升至第四位致死原因。我国近年来胰腺癌发病率及死亡率逐年上升，城市发病率高于农村，约为农村3倍。目前针对胰腺癌无明显有效的治疗手段，若能早期诊断明确进行局部彻底切除尚有潜在治愈可能。但即使病人及早发现病情进行手术切除，术后进行放疗及化学治疗，5年生存率仍不乐观，在15％～40％之间。研究表明，天然多糖具有很好的抗肿瘤生物活性，因此，从桦褐孔菌中发掘具有抗胰腺癌活性的多糖，对于该药用菌的开发利用具有重要意义。

发明内容

本发明的目的是提供一种桦褐孔菌葡聚糖及其制备方法和应用，以解决上述现有技术存在的问题，本发明提供的桦褐孔菌葡聚糖结构新颖，抗胰腺肿瘤活性强，安全性高。

为实现上述目的，本发明提供了如下方案：

本发明提供一种桦褐孔菌葡聚糖，所述葡聚糖的结构式如下所示：

本发明还提供一种上述的桦褐孔菌葡聚糖的制备方法，包括以下步骤：

(1)利用水提醇沉法从桦褐孔菌子实体中提取得到桦褐孔菌粗多糖；

(2)利用溶剂萃取法脱去步骤(1)得到桦褐孔菌粗多糖中的蛋白，之后通过透析截留分子量3500Da以上成分，得到脱蛋白后粗糖；

(3)所述脱蛋白后粗糖通过DEAE-52纤维柱进行纯化，得到纯化后的桦褐孔菌多糖；

(4)所述纯化后的桦褐孔菌多糖上Sephadex G-100凝胶柱，用蒸馏水洗脱，控制流速0.5mL/min，得到所述桦褐孔菌葡聚糖。

进一步地，在步骤(1)中，所述水提醇沉法的具体操作包括：取桦褐孔菌子实体，加入去离子水进行浸提，得到浸提液，所述浸提液浓缩后，加入乙醇，析出桦褐孔菌粗多糖。

进一步地，在步骤(2)中，所述溶剂萃取法所用溶剂为Sevage试剂，即正丁醇和氯仿按体积比为1:4配制。

进一步地，在步骤(3)中，所述纯化的具体操作包括：将所述脱蛋白后粗糖溶于水中，上样于DEAE-52纤维层析柱中，然后分别用蒸馏水、0.05mol/LNaCl、0.1mol/LNaCl、0.2mol/LNaCl进行分段洗脱，控制流速1.0mL/min，分别收集洗脱液，合并多糖洗脱部位，得到纯化后的桦褐孔菌多糖。

本发明还提供一种治疗肿瘤的组合物，所述组合物包括上述的桦褐孔菌葡聚糖和盐酸吉西他滨。

进一步地，所述肿瘤为人胰腺癌。

本发明还提供上述的桦褐孔菌葡聚糖或组合物在制备肿瘤治疗药物中的应用。