[发明专利]一种利用ThioGlo1荧光探针检测角蛋白的方法在审
| 申请号： | 202210305577.8 | 申请日： | 2022-03-25 |
| 公开（公告）号： | CN114739962A | 公开（公告）日： | 2022-07-12 |
| 发明（设计）人： | 李清心;王春凤;吴金川;王钦庆;冯莉;班雯婷 | 申请（专利权）人： | 广东省科学院生物与医学工程研究所 |
| 主分类号： | G01N21/64 | 分类号： | G01N21/64;C09K11/06 |
| 代理公司： | 广州科粤专利商标代理有限公司 44001 | 代理人： | 刘明星;朱聪聪 |
| 地址： | 510000 广东省*** | 国省代码： | 广东;44 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 利用 thioglo1 荧光 探针 检测 角蛋白 方法 | ||
1.一种利用ThioGlo1荧光探针检测角蛋白的方法，其特征在于，是将ThioGlo1荧光探针和角蛋白在液体环境下混合进行反应，然后检测发射波长λem＝510nm左右的荧光强度，激发波长λex＝340nm，判定是否有角蛋白或其浓度。
2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述的角蛋白是废弃角蛋白。
3.根据权利要求2所述的方法，其特征在于，所述的废弃角蛋白为废弃羊毛角蛋白或废弃鸡毛角蛋白。
4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，还包括建立标准曲线，具体步骤为：将ThioGlo1荧光探针和不同浓度的角蛋白标准品在液体环境下混合进行反应，然后检测发射波长λem＝510nm左右的荧光强度，激发波长λex＝340nm，由此建立角蛋白浓度和荧光强度标准曲线；
再将ThioGlo1荧光探针和待测角蛋白样品在液体环境下混合进行反应，然后检测发射波长λem＝510nm左右的荧光强度，激发波长λex＝340nm，根据测定的荧光强度与标准曲线进行比对，获得待测角蛋白浓度。
5.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，具体步骤为：
A、称取ThioGlo1荧光探针，用DMSO配制成1×10-5mol/L的溶液备用；
B、用pH为7.4的磷酸盐缓冲溶液将废弃角蛋白配成1-100×10-5不同浓度的溶液备用；
C、于比色管中依次加入10-30μL ThioGlo1溶液、pH为7.4的磷酸盐缓冲溶液2.5mL、不同浓度的废弃角蛋白溶液20-50μL，磷酸盐缓冲溶液定容至3.0mL，摇匀，室温反应；
D、采用荧光光谱仪检测发射波长λem＝510nm左右的荧光强度，激发波长λex＝340nm。
6.根据权利要求5所述的方法，其特征在于，所述的反应，其反应时间为10-30min。
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