[发明专利]一种银杏叶黄酮纯化物及其抑菌用途

说明书

一种银杏叶黄酮纯化物及其抑菌用途，纯化方法包括NKA‑9大孔树脂和聚酰胺树脂的两步纯化法。抑菌用途包括抑制金黄色葡萄球菌、大肠杆菌和丙二酸盐克罗诺杆菌的用途。本发明的银杏叶黄酮纯化物对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、丙二酸盐克罗诺杆菌的抑菌效果比粗提物更好。

技术领域

本发明涉及一种银杏叶黄酮纯化物及其抑菌用途，属于生物医药技术领域。

背景技术

银杏（Ginkgo biloba L.），是现存种子植物中最古老的孑遗植物，也被称为“活化石”。在国外已被用作食品添加剂。银杏叶的药用价值最为突出，含有多种活性成分，包括黄酮类、内酯类、酚类、萜类、多糖等活性物质。现代医学研究表明，银杏叶黄酮具有抗氧化、抗癌、抗炎、镇痛、改善心血管、抗菌等功效。大量研究表明，银杏叶黄酮是一种有效的抗氧化剂，但其抑菌活性及作用机制的报道较少。我国黄酮类化合物的开发利用技术与国外相比相对落后。由于植物中黄酮类化合物含量低，纯化工艺复杂，产量低，纯度低，限制了黄酮类化合物在现实生活中的应用。

细菌污染引起的食源性疾病是影响人类公共健康和食品安全的最大因素之一。近年来，食源性疾病的高发使得食品污染问题备受关注。由金黄色葡萄球菌、大肠杆菌以及阪崎肠杆菌等食源性致病菌造成了主要的食品安全问题。在一定条件下，大肠杆菌可引起胃肠道感染、尿路感染等局部组织器官感染。金黄色葡萄球菌可以产生肠毒素，是食物中毒、中毒性休克综合征、心内膜炎和术后伤口感染的主要原因。

病原菌引起的食物中毒日益严重和普遍，开发防腐剂是必然的。然而，合成防腐剂及其副产品可能会增加器官功能障碍或缺乏环境相容性的风险。因此，对食品安全提出了更高的要求，研究开发天然、高效、安全、无毒、稳定、广谱抗菌食品防腐剂是一个重要课题。学者们对植物中的黄酮提取物的抗菌保鲜活性进行了大量的基础理论和应用研究，然而由于一般的提取技术得到的黄酮提取物含量低，抑菌效果不显著。

发明内容

本发明的目的在于提供一种对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌以及丙二酸盐克罗诺杆菌抑菌效果更好的银杏叶黄酮纯化物及其抑菌用途，并探讨其可能的抑菌机理。为银杏叶黄酮新型抗菌产品的进一步研究开发提供科学依据。

为实现上述目的及其他相关目的，本发明提供的技术方案是：一种银杏叶黄酮纯化物，制备方法包括下列步骤：

步骤1：将银杏叶黄酮粗提物溶解于乙醇溶液中，调节pH为5-6，得到第一上样液；将大孔树脂浸泡在乙醇溶液中，使大孔树脂溶胀，然后以乙醇冲洗，得到处理后的大孔树脂；预处理后的大孔树脂采用湿法装柱，平衡层析柱9-18h后上样；将第一上样液在处理后的大孔树脂上进行上样；上样流速为0.4-0.8 BV/h；然后以体积分数为60-80%的乙醇溶液作为洗脱剂进行洗脱，洗脱流速为0.9-1.2BV/h；

步骤2：收集步骤1得到的洗脱液，调节洗脱液中的总黄酮含量为2-6mg/mL，得到第二上样液；将聚酰胺树脂浸泡在乙醇溶液中进行预处理，得到预处理后的聚酰胺树脂；预处理后的聚酰胺树脂采用湿法装柱，平衡层析柱9-18h后上样；将第二上样液在预处理后的聚酰胺树脂上进行上样；上样液的流速为0.3-0.9BV/h；再以体积分数为30%、50%、70%、95%的乙醇溶液依次进行梯度洗脱，洗脱剂的流速为1.0BV/h；收集体积分数为95%乙醇洗脱得到的洗脱液，浓缩蒸发后冷冻干燥得到银杏叶黄酮纯化物。

优选的技术方案为：步骤1中，所述银杏叶黄酮粗提物溶解于体积分数为30-50%乙醇溶液中，将大孔树脂浸泡在体积分数为90%-98%乙醇溶液中；所述大孔树脂为NKA-9大孔树脂。

优选的技术方案为：步骤1中，将聚酰胺树脂浸泡在体积分数为90%-98%的乙醇溶液中进行预处理。

优选的技术方案为：聚酰胺树脂的粒径为100-200目。

为实现上述目的及其他相关目的，本发明提供的技术方案是：银杏叶黄酮纯化物抑制金黄色葡萄球菌、大肠杆菌和丙二酸盐克罗诺杆菌的用途。