[发明专利]靶向治疗深部肿瘤的仿生纳米药物载体及其制备方法

权利要求书

1.一种靶向治疗深部肿瘤的仿生纳米药物载体，其特征在于，所述仿生纳米药物载体包括修饰后纳米颗粒和活性药物；

所述修饰后纳米颗粒为对纳米颗粒利用杂合细胞膜包覆后，并将脲酶在包覆所得物一侧固定之后所得；所述杂合细胞膜至少包括癌细胞膜和白细胞膜，所述癌细胞膜和白细胞膜的膜蛋白重量比为2:1；所述癌细胞膜为HepG2癌细胞膜；

所述纳米颗粒为利用4-(4-羧基苯基)卟啉作为配体所制备的金属有机框架纳米颗粒，其制备方法为：将ZrOCl₂·8H₂O、4-(4-羧基苯基)卟啉和苯甲酸作为原料溶解在N,N-二甲基甲酰胺中加热搅拌，反应完成后依次用N,N-二甲基甲酰胺和无水乙醇离心洗涤数次即得；

所述活性药物为坦螺旋霉素和泛素化特异性蛋白酶抑制剂IU1-47；所述活性药物中，所述坦螺旋霉素和泛素化特异性蛋白酶抑制剂IU1-47的重量比为5:1；

所述纳米颗粒与所述活性药物的重量比为25:1。

2.根据权利要求1所述的仿生纳米药物载体，其特征在于，所述杂合细胞膜还包括红细胞膜，所述癌细胞膜、白细胞膜和红细胞膜的膜蛋白重量比为4:2:1。

3.根据权利要求1或2所述的仿生纳米药物载体，其特征在于，所述杂合细胞膜通过将不同细胞膜通过聚碳酸酯多孔膜进行挤压融合而得。

4.根据权利要求1所述的仿生纳米药物载体，其特征在于，在将脲酶进行固定时，固定方法为先将经对纳米颗粒利用杂合细胞膜包覆后的所得物均匀吸附在聚赖氨酸修饰的细胞培养板上，再向培养板中加入N-羟基磺酸基琥珀生物素和链霉亲和素进行反应，然后加入生物素修饰的脲酶进行反应；所述生物素修饰的脲酶为将脲酶溶解于PBS缓冲液中并加入N-羟基磺酸基琥珀生物素反应所得。

5.根据权利要求1所述的仿生纳米药物载体，其特征在于，所述癌细胞膜的获取方法为：1)在培养皿培养HepG2细胞，消化后离心收集癌细胞，将其悬浮在HepesB缓冲液与1％蛋白酶抑制剂混合物中，冰浴冷却5分钟后将细胞匀浆数次，去除细胞核，收集上清液；2)用HepesB缓冲液配制重量体积百分数为30％40％和55％的蔗糖溶液，并按浓度由高到低加入离心管中，将收集的上清液缓慢加到蔗糖密度梯度柱中；3)在4℃下高速离心，收集所需的样品带，用HepesC缓冲液反复吹均匀、离心和重悬，即得。

6.如权利要求1-5任一项所述一种靶向治疗深部肿瘤的仿生纳米药物载体的制备方法，其特征在于，所述制备方法包括将所述活性药物覆载在所述修饰后纳米颗粒之上；进行所述覆载时，为将所述活性药物和所述修饰后纳米颗粒置于溶液中孵育，之后去除未覆载的活性药物，冻干后即得。

7.如权利要求1-5所述的仿生纳米药物载体或根据权利要求6所述制备方法制备得到的仿生纳米药物载体在制备用于靶向治疗深部肿瘤的药物的应用。