[发明专利]一种脱氢枞酸基席夫碱多离子功能型荧光探针及其制备方法和应用

权利要求书

1.一种脱氢枞酸基席夫碱多离子功能型荧光探针，其特征在于：该化合物名称为(E)-7-((3-(1H-苯并[d]咪唑-2-基)2-羟基-5-苄亚胺)氨基)6-溴-1,4a-二甲基-1,2,3,4,4,9,10,10a-八氢菲罗-1-甲酯，结构式为:

2.如权利要求1所述脱氢枞酸基席夫碱多离子功能型荧光探针的制备方法，其特征在于：包括，

脱氢枞酸经过酰氯化、甲酯化、溴代和双硝化反应，制得12-溴-13-硝基脱氢枞酸甲酯；

12-溴-13-硝基脱氢枞酸甲酯经过Fe/HCl还原，制得12-溴-13-氨基脱异丙基脱氢枞酸甲酯；

邻苯二胺与5-溴水杨醛经过成环反应后，再与三氟乙酸反应制得3-(1H-苯并[d]咪唑-2-基)-2-羟基-5-甲基苯甲醛；

12-溴-13-氨基脱异丙基脱氢枞酸甲酯与3-(1H-苯并[d]咪唑-2-基)-2-羟基-5-甲基苯甲醛反应制得所述荧光探针。

3.如权利要求2所述脱氢枞酸基席夫碱多离子功能型荧光探针的制备方法，其特征在于：所述12-溴-13-硝基脱氢枞酸甲酯，其制备方法，包括，

向脱氢枞酸甲苯溶液中加入二氯亚砜进行反应，反应结束后真空旋干，加入甲醇进行甲酯化反应，反应结束后旋干，加入乙醇溶解结晶，得到脱氢枞酸甲酯；其中，所述脱氢枞酸甲苯溶液的浓度为0.4～0.6g/mL，脱氢枞酸与二氯亚砜的用量比为1g:0.2～0.3mL，脱氢枞酸与甲醇的用量比为1g:1～3mL；所述脱氢枞酸与二氯亚砜的反应温度为75～80℃，反应时间为2～4h；所述甲酯化反应温度为75～80℃，反应时间为2～4h；

向脱氢枞酸甲酯的乙腈溶液中加入N-溴代丁二酰亚胺NBS，避光常温反应，反应结束后旋蒸，二氯甲烷洗涤两次，甲醇溶解结晶，得到12-溴代脱氢枞酸甲酯；其中，所述脱氢枞酸甲酯乙腈溶液的浓度为0.15～0.20g/mL，脱氢枞酸甲酯与NBS的用量比1:1.2～1:1.5，反应时间为20～24h；

在冰浴条件下，将12-溴脱氢枞酸甲酯加入到浓硝酸与浓硫酸充分混合的混酸中，进行搅拌，反应结束后直接倒入冰水中静置，减压抽滤，水洗多次，用石油醚:乙酸乙酯的体积比500:1-200:1过柱提纯，制得纯12-溴-13-硝基脱氢枞酸甲酯；其中，浓硝酸由发烟硝酸和水按照体积比5:1调配而成，12-溴脱氢枞酸甲酯与发烟硝酸用量比为1g:6～7ml，12-溴脱氢枞酸甲酯与浓硫酸的用量比为1～3g:1ml，所述消化反应在冰浴条件下反应0.5～1.5h。

4.如权利要求2所述脱氢枞酸基席夫碱多离子功能型荧光探针的制备方法，其特征在于：所述12-溴-13-氨基脱异丙基脱氢枞酸甲酯，其制备方法包括，

在无水乙醇中，将12-溴-13-硝基脱氢枞酸甲酯与铁粉、浓盐酸反应，搅拌回流，反应结束，过滤铁粉，用饱和碳酸氢钠中和至中性，用石油醚:乙酸乙酯体积比为28:1，过柱提纯，制得纯12-溴-13-氨基脱异丙基脱氢枞酸甲酯；

其中，12-溴-13-硝基脱氢枞酸甲酯与蒸馏水的用量比0.22g:1ml，12-溴-13-硝基脱氢枞酸甲酯与铁粉用量比0.22g:0.5g，12-溴-13-硝基脱氢枞酸甲酯与浓盐酸的用量比0.22g:800μl，反应时间为4.5h。