[发明专利]一种高稳定具有抗体结合力的重组蛋白A

说明书

本发明提供了一种高稳定具有抗体结合力的重组蛋白A，其特征在于,所述免疫球蛋白结合蛋白具有SEQ ID NO:1所示的氨基酸序列。本发明还涉及所述免疫球蛋白结合蛋白及蛋白多聚体相关的核酸、载体、宿主细胞及生产方法。本发明由于采用了以上技术方案，与现有技术相比使其具有以下有益效果：免疫球蛋白结合蛋白由葡萄球菌蛋白A的E、C和Z‑domain拼接得到，并意外获得了抗体载量的提升和耐碱特性，进而可用于免疫球蛋白。

技术领域

本发明涉及免疫球蛋白分离纯化技术领域，具体而言，特别涉及一种高稳定具有抗体结合力的重组蛋白A。

背景技术

随着生物技术的出现和发展，对疾病的预防和治疗发生了革命性的变革。如今的生物技术几乎渗透到我们生活的每一个角落，而在这其中针对于抗体的研究也成绩凸显。从多克隆抗体、单克隆抗体再到重组抗体，每一次技术的飞越都会给人们无限的惊喜。但是，像所有其他蛋白质药物一样，抗体的生产技术、生产规模以及纯化技术是制约抗体生产的重要技术环节。而抗体纯化技术又成为了关键，纯化技术的好与坏，规模的大与小，往往决定了一个抗体药物生产的生命力。

将具有特殊结构的亲和分子制成固相吸附剂放置在层析柱中，当要被分离的蛋白混合液通过层析柱时，与吸附剂具有亲和能力的蛋白质就会被吸附而滞留在层析柱中。那些没有亲和力的蛋白质由于不被吸附，直接流出，从而与被分离的蛋白质分开，然后选用适当的洗脱液，改变结合条件将被结合的蛋白质洗脱下来，这种分离纯化蛋白质的方法称为亲和层析。在生物分子中有些分子的特定结构部位能够同其他分子相互识别并结合，如酶与底物的识别结合、受体与配体的识别结合、抗体与抗原的识别结合，这种结合既是特异的，又是可逆的，改变条件可以使这种结合解除。生物分子间的这种结合能力称为亲和力。亲和层析就是根据这样的原理设计的蛋白质分离纯化方法，利用共价连接有特异配体的层析介质分离蛋白质混合物中能特异结合配体的目的蛋白或其它分子的层析技术。

亲和层析是一种吸附层析，抗原（或抗体）和相应的抗体（或抗原）发生特异性结合，而这种结合在一定的条件下又是可逆的。所以将抗原（或抗体）固相化后，就可以使存在液相中的相应抗体（或抗原）选择性地结合在固相载体上，借以与液相中的其他蛋白质分开，达到分离提纯的目的。此法具有高效、快速、简便等优点。

发明内容

为了弥补现有技术的不足，本发明提供了一种高稳定具有抗体结合力的重组蛋白A。

本发明是通过如下技术方案实现的：一种高稳定具有抗体结合力的重组蛋白A，其特征在于, 所述免疫球蛋白结合蛋白具有SEQ ID NO:1所示的氨基酸序列。

本发明还涉及所述免疫球蛋白结合蛋白及蛋白多聚体相关的核酸、载体、宿主细胞及生产方法。

本发明由于采用了以上技术方案，与现有技术相比使其具有以下有益效果：免疫球蛋白结合蛋白由葡萄球菌蛋白A 的E、C和Z-domain拼接得到，并意外获得了抗体载量的提升和耐碱特性，进而可用于免疫球蛋白。

的亲和层析。

本发明的附加方面和优点将在下面的描述部分中变得明显，或通过本发明的实践了解到。

附图说明

本发明的上述和/或附加的方面和优点从结合下面附图对实施例的描述中将变得明显和容易理解，其中：

图1为实施例中纯化得到的蛋白多聚体的电泳图；

图2为载体pET-3a(+)图谱；

图3为挑单克隆→摇菌→送测序的测序结果图；

图4为载体pET-3a(+)-目的基因的图谱。

具体实施方式

为了能够更清楚地理解本发明的上述目的、特征和优点，下面结合附图和具体实施方式对本发明进行进一步的详细描述。需要说明的是，在不冲突的情况下，本申请的实施例及实施例中的特征可以相互组合。