[发明专利]一种白檀组织培养的培养基及其组织培养方法

说明书

本发明提供了一种白檀组织培养的培养基，由MS培养基、植物生长调节剂、硝酸钙、蔗糖和琼脂组成。其中通过添加硝酸钙，提高MS培养基中的钙元素的浓度；通过减少乙二胺四乙酸二钠和硫酸亚铁的含量，降低铁元素的浓度，以更好地适用于白檀组织培养。其中植物生长调节剂包括6‑苄氨基嘌呤和激动素。本发明还提供了一种白檀的组织培养方法，通过白檀种子的消毒、种子的萌发培养、无菌组培苗的获取、组培苗继代培养获得白檀的幼苗，其中种子的萌发培养和组培苗继代培养两个环节，利用了上述白檀组织培养的培养基，能改善白檀的组织培养的效果。

技术领域

本发明涉及植物培养技术领域，尤其涉及一种白檀组织培养的培养基及其组织培养方法。

背景技术

白檀属山矾科山矾属落叶灌木或小乔木，生长在海拔760-2500米的山坡、路边、疏林或密林中。白檀的叶可入药；白檀油在机械行业中用作润滑油，在纺织行业中用来软化羊毛和清除静电，在油墨工业中用作调和剂；白檀木是优质木材可作为家具用材；也是优良的水土保持树种之一。白檀应用广泛，开发前景广阔，但是白檀的种子具有休眠的特性，白檀的人工播种复杂且发芽率不高。在强烈人工或自然变温条件下，能使白檀当年播种出苗率达到44％左右，有些可能需要待第2年方可萌发；且种子繁殖不易保持母体的优良性状。单一、低效的繁殖方式是阻碍白檀研究工作和产业发展的瓶颈。

组织培养是一种高效的无性繁殖方法，既可以提高繁殖效率，又可以保留母株的优良性状，在种苗快繁、良种选育等方面发挥重要作用。开发白檀组织培养技术是解决白檀繁殖问题的快捷、有效途径，可在白檀种苗快繁、良种选育、种苗快繁等领域发挥重要作用。

白檀的组织培养中使用MS培养基作为基本培养基，根据白檀生长特性对钙、铁离子含量进行了调整，调整后的培养基更适合白檀组培苗的生长。白檀的组织培养效果主要从种子的萌发率、组培苗的平均出芽率、生长高度以及分化率四方面来评价。未经改良的MS培养基和浓度不适合的植物生长调节剂应用在白檀的组织培养中，会造成白檀的组织培养效果不佳。

发明内容

本申请提供了一种白檀组织培养的培养基及其组织培养方法，来解决白檀的组织培养效果不佳的问题。

为解决白檀的组织培养效果不佳的问题，本申请提供了一种用于白檀组织培养的培养基，由改良的MS培养基、植物生长调节剂、硝酸钙、蔗糖和琼脂组成。

所述改良MS培养基各组分的含量为；

硝酸钾1900mg/L；硝酸铵1650mg/L；磷酸二氢钾170mg/L；七水硫酸镁370mg/L；二水氯化钙440mg/L；碘化钾0.83mg/L；硼酸6.2mg/L；四水硫酸锰22.3mg/L；硫酸锌 8.6mg/L；钼酸钠0.25mg/L；硫酸铜0.025mg/L；氯化钴0.025mg/L；乙二胺四乙酸二钠 26.11mg/L；硫酸亚铁19.46mg/L；肌醇100mg/L；甘氨酸2mg/L；盐酸硫胺素0.1mg/L；盐酸吡哆醇0.5mg/L；烟酸0.5mg/L。

本申请通过将硫酸亚铁浓度降至19.46mg/L、乙二胺四乙酸二钠浓度降至26.11mg/L，改变了MS培养基中铁的含量，避免因铁元素含量过高，影响白檀的萌发、分化、生长。

可选的，所述蔗糖含量为30g/L，可以作为培养基的碳源，为植物的生长提供能量，同时还可以作为培养基的渗透调节剂；所述琼脂的含量为6g/L，作为培养基的凝固剂，将液体培养基转化为固体培养基。

可选的，所述培养基pH值调整为5.8-6.0，更适合白檀种子的萌发和白檀组培苗的生长。

可选的，所述植物生长调节剂包括6-苄氨基嘌呤(6-BA)和激动素(KT)。所述6- 苄氨基嘌呤浓度为1.1-1.3mg/L，所述激动素的浓度为0.1mg/L。6-苄氨基嘌呤可以促进细胞的生长，促进白檀芽的形成。激动素是细胞分裂素的一种，可诱导离体组织细胞的分裂和调节分化，促进白檀组培苗的生长、分化。