[发明专利]抗人程序性死亡配体-1（PD-L1）的抗体及其应用

说明书

本发明公开了特异性结合人程序性死亡配体‑1(PD‑L1)的抗体或抗原结合片段，所述抗体或抗原结合片段能够增强T细胞的功能，上调T细胞介导的免疫应答和用于治疗PD‑L1表达异常相关和/或T细胞功能异常的疾病，例如肿瘤的用途。

技术领域

本发明涉及抗人程序性死亡配体-1(PD-L1)的抗体或其抗原结合片段，其编码核酸、表达载体和表达细胞、制备方法、药物组合物、以及它们用于增强T细胞的功能，上调T细胞介导的免疫应答和用于治疗PD-L1表达异常和T细胞功能异常相关的疾病，如肿瘤的用途。

背景技术

免疫治疗已成为肿瘤治疗中发展最为迅速、最具前景的研究领域之一，而运用免疫检查点抑制剂，如PD-1/PD-L1单抗，CTLA-4单抗则是肿瘤免疫疗法革命性的治疗方法，大大地提高了恶性肿瘤患者地生存期。

T细胞介导的免疫反应受到共刺激和共抑制机制的严格调控，在抗原免疫反应和维持自我耐受之间保持最佳平衡。该平衡由多种激活性和抑制性蛋白参与。抑制性蛋白，也被称为免疫检查点类蛋白，调节杀伤性T细胞(cytotoxic T lymphocyte,CTL)的激活和效应功能，以维持自我耐受性。免疫检查点类抑制性蛋白在肿瘤的调节通路中起着关键作用，其中一个重要的免疫检查点蛋白PD-1，与其配体PD-L1结合后，会传导免疫抑制信号，降低T细胞的活性。同时肿瘤细胞也可以通过在细胞表面表达PD-L1来抑制T细胞的激活和增殖，从而逃避CTL的攻击和杀伤。利用PD-1或PD-L1单抗，阻止PD-1/PD-L1的结合和相互作用，可以部分恢复T细胞的功能，从而增强杀伤肿瘤细胞的能力。

2011年，第一个免疫检测点抑制剂伊普利单抗作为一种抗CTLA-4单克隆抗体，成为成功用于治疗黑色素瘤的肿瘤免疫疗法，至今治疗的很多患者已获得相比与传统治疗方法更好的5年生存期。之后，FDA又先后批准了3个PD-1单抗和3个PD-L1单抗，成功地用于免疫治疗除黑色素瘤之外的十几种肿瘤，并成为多种癌症的一线治疗手段，如非小细胞肺癌(NSCLC)、肾细胞癌(RCC)和膀胱或尿路上皮癌等。中国至今已批准了2个进口PD-1抗体和4个国产PD-1抗体上市，但是还没有国产PD-L1抗体获批，并且鉴于PD-L1抗体与PD-1 抗体治疗机理上及目前临床试验联用药物和适用适应症的不同，研发新的PD-L1单抗和基于 PD-L1的双抗仍然有重大的社会和经济意义。

发明内容

本发明提供了特异性结合PD-L1的嵌合抗体或人源化抗体或抗原结合片段、多特异性抗原结合分子、嵌合抗原受体、免疫效应细胞、核酸片段、载体、细胞、组合物、制备方法、制药用途以及疾病治疗方法。

在一些实施方案中，特异性结合人程序性死亡配体-1(PD-L1)的分离的抗体或抗原结合片段的重链可变区和轻链可变区分别具有SEQ ID NO:3和SEQ ID NO:4所示序列，或者与 SEQ ID NO:3和SEQ ID NO:4所示序列相比具有至少80％、85％、90％、95％、96％、97％、98％、 99％或更高一致性的序列。

在一个优选实施方案中，本发明的抗体或抗原结合片段，其与人程序性死亡配体-1 (PD-L1)结合的解离常数(KD)不大于2.1×10^-9M，与食蟹猴程序性死亡配体-1(PD-L1)结合的解离常数(KD)不大于1.2×10^-9M。

在一个优选实施方案中，本发明的抗体或抗原结合片段是嵌合的或人源化的或全人源的。

在一个优选实施方案中，本发明的抗体或其抗原结合片段，包含人或鼠抗体IgG1、IgG2、IgG3、IgG4、IgA、IgM、IgE或IgD任何其中之一恒定区的序列；优选包含人或鼠抗体IgG1、 IgG2、IgG3或IgG4的恒定区的序列；或携带突变的人或鼠抗体IgG1、IgG2、IgG3或IgG4 的恒定区的序列。

在一个优选实施方案中，本发明所述抗原结合片段选自F(ab)2、Fab’、Fab、Fv、scFv、双特异抗体、纳米抗体和抗体最小识别单位中的一种或多种。