[发明专利]一种诱导马铃薯黑痣病抗性基因StZFP2及其应用在审
申请号: | 202210216936.2 | 申请日: | 2022-03-07 |
公开(公告)号: | CN114561399A | 公开(公告)日: | 2022-05-31 |
发明(设计)人: | 张笑宇;冯亚艳;张冬梅;霍宏丽;李乐乐;李得宙 | 申请(专利权)人: | 内蒙古农业大学 |
主分类号: | C12N15/29 | 分类号: | C12N15/29;C12N15/11;C12N15/82;C12N15/84;A01H5/00;A01H6/82;A01N37/46;A01N47/44;A01N57/16;A01P3/00;A01P21/00 |
代理公司: | 北京慕达星云知识产权代理事务所(特殊普通合伙) 11465 | 代理人: | 崔自京 |
地址: | 010020 内蒙古自治区呼和*** | 国省代码: | 内蒙古;15 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 诱导 马铃薯 黑痣 抗性 基因 stzfp2 及其 应用 | ||
1.一种马铃薯诱导抗病基因StZFP2,其特征在于,所述基因为锌指蛋白基因,受硅酸钠诱导,该基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。
2.如权利要求1所述的马铃薯诱导抗病基因StZFP2在马铃薯抗黑痣病中的应用;
优选的,所述马铃薯诱导抗病基因StZFP2的表达受硅酸钠诱导。
3.如权利要求1所述的马铃薯诱导抗病基因StZFP2,其特征在于,该基因编码蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示。
4.一种生物材料,其特征在于,为下述(1)-(3)中的至少一种;
(1)含有所述锌指蛋白基因StZFP2核酸分子的表达盒;
(2)含有(1)所述表达盒的核酸分子的重组载体;
(3)含有(1)所述表达盒的核酸分子的重组微生物或含有(2)所述重组载体的重组微生物。
5.如权利要求4所述的生物材料,其特征在于,(1)中,所述表达盒包括锌指蛋白基因StZFP2核酸分子和标记元件;
优选的,所述标记元件为光标记元件;
更优选的,所述光标记元件为GFP。
6.如权利要求4所述的生物材料,其特征在于,(2)中,所述含有(1)所述表达盒的核酸分子的重组载体为pCAMBIA1302-StZFP2;
优选的,所述重组表达载体为pCAMBIA1302-35S-StZFP2。
7.如权利要求4所述的生物材料,其特征在于,(3)中,所述含有(1)所述表达盒的核酸分子的重组微生物或含有(2)所述重组载体的重组微生物为克隆菌株、穿梭菌株和工程菌株的一种或多种;
优选的,所述克隆菌株为DH5α;
优选的,所述穿梭菌株为农杆菌。
8.一种锌指蛋白基因StZFP2的克隆装置,其特征在于,包括扩增引物:
T-StZFP2-F:5’-ATGAGTGCCTTAAAAAGAAGCAGAG-3’;
T-StZFP2-R:5’-AATAAAAATTCTCAAAACAGGAGAT-3’;
优选的,还包括聚合酶链式反应的必要元素中的一种或多种;
优选的,所述聚合酶链式反应的必要元素为dNTP、反应缓冲液、DNA聚合酶或Mg2+中的一种或多种。
9.如权利要求8所述的克隆装置的使用方法,其特征在于,反应条件为:94℃预变性5min;94℃变性30s,55℃退火1min,72℃延伸30s,35个循环,最后72℃运行10min。
10.如权利要求1所述的基因、权利要求2所述的应用、权利要求3所述的蛋白、权利要求4-7所述的生物材料、权利要求8所述克隆装置和权利要求9所述的方法在提高马铃薯清除活性氧能力、抗黑痣病中的应用;
优选的,所述黑痣病马铃薯黑痣病;
优选的,如上所述的应用,包括以下步骤:
将所述锌指蛋白基因StZFP2过表达载体转入大西洋马铃薯;
优选的,所述锌指蛋白基因StZFP2的表达受硅酸钠诱导。
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