[发明专利]一种无标型免疫传感器及其制备方法、应用与应用方法

说明书

本发明适用于生物技术领域，提供了一种无标型免疫传感器及其制备方法、应用与应用方法，其中，所述无标型免疫传感器是以玻碳电极为基底，依次修饰Cu₂S/Pd/CuO、癌胚抗原抗体、牛血清蛋白以及癌胚抗原而得。Cu₂S/Pd/CuO纳米复合材料不仅具有优良的导电性，而且具有协同放大催化信号的作用，可以增大免疫传感器的灵敏度，精确定量检测肿瘤标志物癌胚抗原，对癌胚抗原的线性检测范围是100fg/ml到100ng/ml，最低检测下限为33.11fg/ml。

技术领域

本发明属于生物技术领域，尤其涉及一种无标型免疫传感器及其制备方法、应用与应用方法。

背景技术

众所周知，结直肠癌是世界上最常见的恶性肿瘤之一。在恶性肿瘤中发病率排名第三，死亡率位居第二。癌胚抗原作为结直肠肿瘤诊断的一个重要指标,在结直肠癌患者诊断、治疗、复发和转移方面具有重要的指导价值。此外，癌胚抗原也与其他肿瘤相关疾病，如肺癌、乳腺癌及胰腺癌等密切相关。因此，建立一种快速、灵敏、可靠的癌胚抗原检测方法是十分必要的。

电化学免疫传感器是一种将生物化学反应转化为电信号的生物传感装置，是基于高灵敏传感技术与特异性免疫反应相结合，研究抗原及其对应抗体反应动力学的生物传感装置，具有特异性高、灵敏度高的优点。特别是无标记免疫传感器直接检测抗原-抗体复合物的信号变化，极大地简化了传感器的制备和操作，且不需要二次抗体标记，有利于肿瘤标志物的实际检测。

发明内容

本发明实施例旨在提供一种无标型免疫传感器。

本发明实施例是这样实现的，一种无标型免疫传感器，所述无标型免疫传感器是以玻碳电极为基底，依次修饰Cu₂S/Pd/CuO、癌胚抗原抗体、牛血清蛋白以及癌胚抗原而得。

本发明实施例还提供一种无标型免疫传感器的制备方法，包括：

将Cu₂S/Pd溶液加到经抛光处理后的玻碳电极的表面进行孵育处理，得Cu₂S/Pd修饰玻碳电极；

将所述Cu₂S/Pd修饰玻碳电极以及过氧化氢溶液置于磷酸盐缓冲液中进行反应，得到Cu₂S/Pd/CuO修饰玻碳电极；

在所述Cu₂S/Pd/CuO修饰玻碳电极表面依次修饰癌胚抗原抗体、牛血清蛋白以及癌胚抗原，即得。

本发明实施例还提供一种无标型免疫传感器在检测癌胚抗原中的应用，所述无标型免疫传感器为上述的无标型免疫传感器。

本发明实施例还提供一种无标型免疫传感器在检测癌胚抗原中的应用方法，其特征在于，包括：

使用电化学工作站，在三电极体系下进行测试，以饱和甘汞电极为参比电极，以铂丝电极为对电极，以上述的无标型免疫传感器为工作电极，在10mL pH＝5.91～7.73磷酸盐缓冲溶液中进行测试；

通过时间-电流曲线法进行检测，初始电压为-0.4V；待电流稳定后，向10mL的磷酸盐缓冲溶液中注入10μL、5mol/L的过氧化氢溶液，分别记录不同浓度的癌胚抗原所产生的电流值；

利用工作曲线法，得到待测样品中癌胚抗原的浓度。