[发明专利]前列腺癌/乳腺癌骨转移小分子标志物及临床检测试剂盒

说明书

本发明提供了前列腺癌/乳腺癌骨转移小分子标志物及临床检测试剂盒。前列腺癌、乳腺癌骨转移的生物标志物，包括IL‑8或S100A4。本发明还制备了IL‑8/S100A4磁性抗体，并进一步开发了IL‑8/S100A4医用检测试剂盒，适用于早期诊断肿瘤骨转移以及在肿瘤治疗过程中监视肿瘤骨转移。

技术领域

本发明属于肿瘤医学检测技术领域，涉及前列腺癌/乳腺癌骨转移小分子标志物及临床检测试剂盒。

背景技术

骨转移是恶性肿瘤常见并发症之一，严重影响患者生存及生活质量，尤其在乳腺癌、前列腺癌和肺癌三大高发恶性肿瘤中，骨转移具有发生率高、致残致死率高的特点（Siegel RL, Miller KD, Fuchs HE, Jemal A. CA Cancer J Clin. 2021;71(1):7-33.,Hernandez R K, Wade S W, Reich A, et al. BMC cancer, 2018;18(1): 1-11.），如图1所示。

肿瘤骨转移导致骨组织破坏，严重时可导致疼痛、脊髓压迫、高钙血症和病理性骨折等相关不良事件（skeletal-related event，SER）发生。而且肿瘤细胞侵入骨骼后可造成放化疗抵抗，增加肿瘤恶性程度，加速了肿瘤致残致死的进程（Lipton A, et al.Cancer.2000;88:1082-1090.，Saad F, et al. J Natl Cancer Inst. 2004; 96:879-882.，Yin JJ, et al. Cell Res. 2005;15(1):57-62.）。乳腺癌和前列腺癌前期治疗中多选用激素受体抑制性的内分泌治疗，耐药复发时多发生远程转移，尤其是因骨转移导致骨损伤达50%上下（Howard LE, et al. Prostate Cancer Prostatic Dis. 2016;19(4):380-384., Yang M, et al. Discov Med. 2019;27(149):211-220.），如图2所示。

目前肿瘤骨转移诊断技术主要是全身骨显像（锝99标记MDP核素显像）和MRI（核磁共振）（Krishnamurthy GT, Blahd WH. Nucl Med (Stuttg). 1975;13(4):330-40. ,Cook GJ. Cancer Imaging. 2010;10(1):1-8.），但缺乏针对肿瘤骨转移预测及评价的特异性生物学检测指标。因此，临床上只能确定骨转移事件的发生，却不能预测骨转移发生的趋势和严重程度。抑制雄、雌性激受体（AR、ER）活性为目标的内分泌治疗可有效地减少前列腺癌和乳腺癌原发病灶，降低相关的生化指标（如前列腺癌PSA），但同时具有促进肿瘤转移的潜在风险（DiNatale A, Fatatis A. Adv Exp Med Biol. 2019;1210:171-184.,Hiscox S, et al. Eur J Cancer. 2010;46(12):2187-95.）。

因此，肿瘤骨转移机制仍不清晰，分子靶向尚不明确，有效诊断和治疗方案匮乏，在全球医疗界是一个严峻的挑战。特别是在肿瘤骨转移之前和骨转移早期，临床上缺乏特异性高、敏感性好的实验检测方法，肿瘤骨转移早期诊断技术亟待开发。

发明内容

针对上述技术问题，本发明提供了前列腺癌/乳腺癌骨转移小分子标志物及临床检测试剂盒。

为了实现本发明的技术目的，本发明采用的技术方案为：

本发明提供了小分子标志物IL-8或S100A4在制备前列腺癌、乳腺癌骨转移检测试剂中的应用。

本发明还提供了IL-8/S100A4磁性抗体的制备方法，包括：

1）取羧基磁珠用pH=6.0的MES缓冲液清洗后，再将磁珠复悬于pH=6.0的MES缓冲液，调至磁珠浓度为100mg/ml；

2）将EDC-MES缓冲液和 Sulfo-NHS-MES缓冲液加入到步骤1）得到的磁珠中混匀，调至磁珠浓度为50 mg/ml，25℃下活化30分钟；