[发明专利]一种胞外分泌表达Ulp1蛋白酶的大肠杆菌基因工程菌株及其应用在审
| 申请号： | 202210157006.4 | 申请日： | 2022-02-21 |
| 公开（公告）号： | CN114426586A | 公开（公告）日： | 2022-05-03 |
| 发明（设计）人： | 董娜;付灵龙;吴迪 | 申请（专利权）人： | 中国农业大学 |
| 主分类号： | C07K19/00 | 分类号： | C07K19/00;C12N9/60;C12N15/62;C12N15/70;C12N1/21;C12R1/19 |
| 代理公司： | 北京路浩知识产权代理有限公司 11002 | 代理人： | 商秀玲 |
| 地址： | 100193 *** | 国省代码： | 北京;11 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 外分泌 表达 ulp1 蛋白酶 大肠杆菌 基因工程 菌株 及其 应用 | ||
1.一种Ulp1蛋白酶的融合蛋白，其特征在于，所述融合蛋白的氨基酸序列含有顺次连接的信号肽序列、标签蛋白序列、linker序列以及Ulp1蛋白酶序列；
其中，所述Ulp1蛋白酶序列如SEQ ID NO.1所示；所述信号肽序列如SEQ ID NO.2所示。
2.根据权利要求1所述的融合蛋白，其特征在于，所述标签蛋白为6×His标签；所述linker序列如SEQ ID NO.3所示；
优选地，所述融合蛋白具有如SEQ ID NO.4所示的氨基酸序列。
3.编码权利要求1或2所述的融合蛋白的核酸分子。
4.含有权利要求3所述的核酸分子的载体。
5.根据权利要求4所述的载体，其特征在于，所述载体为含有权利要求3所述的核酸分子的pET22b质粒。
6.一种大肠杆菌基因工程菌株，其特征在于，其含有权利要求4或5所述的载体。
7.根据权利要求6所述的大肠杆菌基因工程菌株，其特征在于，所述菌株的pal基因被敲除。
8.根据权利要求7所述的大肠杆菌基因工程菌株，其特征在于，所述菌株为pal基因敲除的大肠杆菌BL21(DE3)。
9.权利要求6～8任一项所述的大肠杆菌基因工程菌株在制备Ulp1蛋白酶中的应用。
10.一种Ulp1蛋白酶的制备方法，其特征在于，所述方法包括：培养权利要求6～8任一项所述的大肠杆菌基因工程菌株，收集培养液上清；
优选地，所述培养使用的培养基中含有0.5-1.5％的甘氨酸。
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