[发明专利]一种酶生物传感器及其制备方法和应用

权利要求书

1.一种酶生物传感器的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

1) 将基底电极浸入镀金液中进行电沉积，得到纳米多孔金修饰的基底电极；

2) 将纳米多孔金修饰的基底电极浸入硫辛酸溶液中进行自组装，得到自组装膜修饰的基底电极；

3) 将自组装膜修饰的基底电极浸入含1-乙基-3-(3-二甲氨丙基)碳二亚胺盐酸盐和N-羟基琥珀酰亚胺的溶液中进行活化，得到活化的基底电极；

4) 将含甘油激酶、甘油三磷酸氧化酶和壳聚糖的溶液涂覆在活化的基底电极表面，干燥，得到酶修饰的基底电极；

5) 将酶修饰的基底电极、参比电极和对电极组成三电极体系，即得酶生物传感器；

步骤1）所述镀金液为HAuCl₄-H₂SO₄溶液，HAuCl₄的浓度为1mmol/L～100mmol/L，H₂SO₄的浓度为1mol/L～5mol/L；

步骤1）所述电沉积采用恒电位法，沉积电压为-1V～-4V，沉积时间为10s～90s；

所述酶生物传感器为由酶修饰的基底电极、参比电极和对电极组成的三电极体系；所述酶修饰的基底电极的组成包括依次设置的基底电极、纳米多孔金修饰层、活化的硫辛酸自组装膜层和酶修饰层；所述酶修饰层的组成包括甘油激酶、甘油三磷酸氧化酶和壳聚糖；所述活化的硫辛酸自组装膜层由硫辛酸自组装膜经过1-乙基-3-(3-二甲氨丙基)碳二亚胺盐酸盐和N-羟基琥珀酰亚胺活化制成。

2.根据权利要求1所述的酶生物传感器的制备方法，其特征在于：所述参比电极为饱和甘汞电极；所述对电极为铂电极；所述基底电极为金盘电极。

3.根据权利要求1所述的酶生物传感器的制备方法，其特征在于：步骤2）所述自组装的时间为1h～5h。

4.根据权利要求1所述的酶生物传感器的制备方法，其特征在于：步骤3）所述含1-乙基-3-(3-二甲氨丙基)碳二亚胺盐酸盐和N-羟基琥珀酰亚胺的溶液中1-乙基-3-(3-二甲氨丙基)碳二亚胺盐酸盐、N-羟基琥珀酰亚胺的摩尔比为2.8～3.2:1。

5.根据权利要求1、3和4中任意一项所述的酶生物传感器的制备方法，其特征在于：步骤3）所述活化的时间为40min～80min。

6.权利要求1～5中任意一项所述的制备方法制得的酶生物传感器在甘油检测中的应用。