[发明专利]一种中药薏苡仁中的新生物碱及其提取纯化方法和应用

权利要求书

1.一种化合物coixdine A和coixdine B，其结构式为：

2.根据权利要求1所述的化合物coixdine A和coixdine B的提取纯化方法，其特征在于，所述提取纯化方法包括如下步骤：

1)取干燥的薏苡仁80～120kg，经3～7倍量的甲醇加热回流提取2～6次，每次1～5小时，过滤合并滤液，采用旋转蒸发仪回收溶剂，得浸膏1156～1856g；所得浸膏加入5L蒸馏水分散，分别用石油醚、乙酸乙酯、正丁醇依次萃取，体积比为1：1，每种极性溶剂萃取2～6次，分别合并各萃取液，经旋转蒸发仪回收溶剂，分别得到石油醚萃取部位342～523g，乙酸乙酯萃取部位32.9～54.3g，正丁醇萃取部位198～302g以及水部位；

2)将乙酸乙酯部位萃取物加甲醇进行复溶，后用80～100目硅胶拌样，样品与硅胶质量比为1：1.2，湿法装柱，经硅胶柱色谱以二氯甲烷-甲醇为流动相进行梯度洗脱，洗脱比例为100：0～0：100，采用薄层色谱检识合并相同流份，得到7个组分Fr.1～Fr.7；

3)将Fr.7经反相ODS柱色谱以比例1：9～10：0的甲醇-水梯度洗脱得到9个组分Fr7.1～Fr7.9；Fr7.5经HPLC高效液相色谱纯化，得到化合物coixdine A 9.8～16.1mg和coixdineB 2.6～4.4mg。

3.根据权利要求2所述的提取纯化方法，其特征在于，所述提取纯化方法具体包括如下步骤：

1)取干燥的薏苡仁90～110kg，经4～6倍量的甲醇加热回流提取3～5次，每次2～4小时，过滤合并滤液，采用旋转蒸发仪回收溶剂，得浸膏1360～1660g；所得浸膏加入5L蒸馏水分散，分别用石油醚、乙酸乙酯、正丁醇依次进行1：1的萃取，每种极性溶剂萃取3～5次，合并萃取液，经旋转蒸发仪回收溶剂，分别得到石油醚萃取部位392～481g，乙酸乙酯萃取部位38.2～48.1g，正丁醇萃取部位220～269g以及水部位；

2)将乙酸乙酯部位萃取物加甲醇进行复溶，后用80～100目硅胶拌样，样品与硅胶质量比为1：1.2，湿法装柱，经硅胶柱色谱以二氯甲烷-甲醇为流动相进行梯度洗脱洗脱比例为100：0～0：100，采用薄层色谱检识合并相同流份，得到7个组分Fr.1～Fr.7；

3)将Fr.7经反相ODS柱色谱以比例1：9-10：0的甲醇-水梯度洗脱得到9个组分Fr7.1-Fr7.9；Fr7.5经HPLC高效液相色谱纯化，得到化合物coixdine A 11.4～13.9mg和coixdineB 3.1～3.8mg。

4.根据权利要求3所述的提取纯化方法，其特征在于，所述提取纯化方法具体包括如下步骤：

1)取干燥的薏苡仁98kg，经5倍量的甲醇加热回流提取4次，每次3小时，过滤合并滤液，采用旋转蒸发仪回收溶剂，得浸膏1481g；所得浸膏加入5L蒸馏水分散，分别用石油醚、乙酸乙酯、正丁醇依次进行1：1的萃取，每种极性溶剂萃取4次，合并萃取液，经旋转蒸发仪回收溶剂，分别得到石油醚萃取部位428g，乙酸乙酯萃取部位42g，正丁醇萃取部位240g以及水部位；

2)将乙酸乙酯部位萃取物加甲醇进行复溶，后用80～100目硅胶拌样,样品与硅胶质量比为1：1.2，湿法装柱，经硅胶柱色谱以二氯甲烷-甲醇为流动相进行梯度洗脱，洗脱比例为100：0～0：100，采用薄层色谱检识合并相同流份，得到7个组分Fr.1～Fr.7；

3)将Fr.7经反相ODS柱色谱以比例1：9～10：0的甲醇-水梯度洗脱得到9个组分Fr7.1～Fr7.9；Fr7.5经HPLC高效液相色谱纯化，得到化合物coixdine A 12.4mg和coixdine B3.4mg。

5.根据权利要求2-4任一项所述的提取纯化方法，其特征在于，所述步骤1)中旋转蒸发仪处理温度为40℃。

6.根据权利要求2-4任一项所述的提取纯化方法，其特征在于，所述步骤3)中色谱纯化的条件为：以体积比53:47的甲醇-水为流动相，流速3mL/min，保留时间分别为18.3min和21.1min。