[发明专利]一种细胞外囊泡微囊材料及其制备方法和用途

说明书

本发明公开了一种细胞外囊泡微囊材料及其制备方法和用途，涉及皮肤修复材料和细胞外囊泡材料技术领域，所述细胞外囊泡微囊材料由细胞外囊泡，羧甲基几丁糖，马齿苋提取物，甘油，玻尿酸钠和水等组成；本发明的细胞外囊泡微囊材料，能用于急慢创伤修复材料、面部动力性皱纹填充材料和肌肤修复和抗衰老材料中，具有很好的修复、填充皮肤的作用，抗衰老效果明显；本发明的细胞外囊泡微囊材料的制备方法，通过β射线处理技术使羧甲基几丁糖凝胶进行交联，将细胞外囊泡外层充分包被在羧甲基几丁糖凝胶中，形成微囊结构，细胞外囊泡聚集在凝胶网格中，能够保持细胞外囊泡上蛋白质、脂质、核糖和多糖等生物分子的活性。

技术领域

本发明涉及皮肤修复材料和细胞外囊泡材料技术领域，具体说是一种细胞外囊泡微囊材料及其制备方法和用途。

背景技术

面部修复材料包括急慢创伤修复材料、面部动力性皱纹填充材料和肌肤修复和抗衰老材料等。皮肤随着年龄的增大，会出现血液循环变慢，皮下组织脂肪层开始变得松弛而欠缺弹性等问题，或者在受到外部伤害后皮肤也会出现伤口，面部修复材料能够通过涂覆或者浅导促进伤口的愈合，包括各种组织的再生、肉芽组织增生、疤痕组织的形成，是各种过程的协同作用，好的面部修复材料能够从时间上减少人们的痛苦并且在最大程度上减少疤痕的产生。

目前市面上用得较多的创伤修复材料主要分为天然生物材料(自体组织、异体组织和异种组织)、人工生物材料( 动物性、植物性、金属材料等)和复合生物材料三种。其中，人工生物材料容易产生免疫反应，并且修复填充效果不佳；天然生物材料及复合生物材料由于其自身修复上的优势在低温生物保存技术改进和提高后有着充分广阔的前景。如壳聚糖作为地球上含量仅低于纤维素的天然多糖，主要存在于植物，海洋无脊椎动物，昆虫，真菌细胞壁和微生物中，来源广泛，不仅具有良好的物理机械性能，还有很好的生物相容性和降解性，无毒性，可以用于创面修复；但是壳聚糖本身的修复能力并不佳需要进行改性处理。

细胞外囊泡是一种由细胞释放到细胞外基质的膜性小囊泡，广泛地存在于各种体液和细胞上清液中，其表面携带蛋白质、脂质、核糖和多糖等生物活性分子，可以在细胞间传递信号，在细胞通讯、细胞迁移、血管新生、细胞修复过程中有着重要作用，因此细胞外囊泡是理论上可以修复细胞的天然生物材料，但是如何保存细胞外囊泡，保持其携带的蛋白质、脂质、核糖和多糖等生物分子的活性是现在亟需解决的问题。

目前对细胞外囊泡的保存条件进行的研究发现，细胞外囊泡的储存条件严苛，需要在-20℃~-80℃下进行保存，并且即使在上述温度下保存也会对其性能有明显的影响，如中性粒细胞来源的细胞外囊泡样品中囊泡数量和形态没有明显变化，但是其磷酯酰丝氨酸外翻明显增多的情况，影响细胞外囊泡的性能。

发明内容

为解决外囊泡不易保存，现有的保存条件影响其生物活性的问题，本发明的目的是提供一种细胞外囊泡微囊材料及其制备方法和用途。

本发明为实现上述目的，通过以下技术方案实现：

一种细胞外囊泡微囊材料，以重量份计，由以下原料组成：细胞外囊泡20~30份，羧甲基几丁糖1~2份，马齿苋提取物1~5份，甘油3~5份，PE9010 3~5份，玻尿酸钠1~2份和水50~70份。

优选的，以重量份计，由以下原料组成：细胞外囊泡25份，羧甲基几丁糖1.5份，马齿苋提取物4份，甘油4份，PE9010 4份，玻尿酸钠1.5份和水60份。

优选的，所述羧甲基几丁糖为脱蛋白羧甲基几丁糖。

优选的，所述细胞外囊泡的直径为30~200纳米。

本发明还包括一种细胞外囊泡微囊材料的制备方法，包括以下步骤：

①以重量份计，将羧甲基几丁糖1~2份加入到水50~70份中，搅拌分散乳化20~30分钟，向其中加入醋酸至pH为2~4，在低于50转/分的转速下搅拌20~30分钟，向其中加入氢氧化钠调节pH值至6.8~8.5得到凝胶，待用；