[发明专利]一种负载cRGD和小分子抗肿瘤药物的复合外泌体及其制备方法和应用在审
| 申请号： | 202210115616.8 | 申请日： | 2022-02-07 |
| 公开（公告）号： | CN114588274A | 公开（公告）日： | 2022-06-07 |
| 发明（设计）人： | 刘继勇;顾永卫;杜月;武鑫;姜良弟;李丹;唐晓萌;李爱雪;赵语南 | 申请（专利权）人： | 复旦大学附属肿瘤医院 |
| 主分类号： | A61K47/69 | 分类号： | A61K47/69;A61K47/62;A61K31/585;A61K45/00;A61P35/00;C12N5/10 |
| 代理公司： | 上海申浩律师事务所 31280 | 代理人： | 李阳 |
| 地址： | 200032 *** | 国省代码： | 上海;31 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 负载 crgd 分子 肿瘤 药物 复合 外泌体 及其 制备 方法 应用 | ||
1.一种负载cRGD和小分子抗肿瘤药物的复合外泌体，其特征在于，所述的外泌体的膜表面携带靶向于整合素αvβ3受体的环状多肽cRGD，膜内包载小分子抗肿瘤药物。
2.根据权利要求1所述的负载多肽cRGD和小分子抗肿瘤药物的复合外泌体给药系统，其特征在于，所述的复合外泌体是先从细胞培养上清中提取细胞分泌的外泌体EXO；再通过后插入法将环状多肽cRGD嵌入EXO膜中，得cRGD-EXO；再将小分子抗肿瘤药物载入cRGD-EXO膜中制得，即cRGD-EXO/小分子药物。
3.根据权利要求1所述的负载多肽cRGD和小分子抗肿瘤药物的复合外泌体，其特征在于，所述的外泌体来源的细胞选自间充质干细胞、巨噬细胞、NK细胞、T细胞、及肿瘤细胞中的一种或两种以上。
4.根据权利要求1所述的负载多肽cRGD和小分子抗肿瘤药物的复合外泌体，其特征在于，所述的小分子抗肿瘤药物来源于天然药物。
5.根据权利要求4所述的负载多肽cRGD和小分子抗肿瘤药物的复合外泌体，其特征在于，所述的天然药物为雷公藤甲素TPL。
6.一种如权利要求1-5任一所述的负载多肽cRGD和小分子抗肿瘤药物的复合外泌体的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：
S1.采用梯度超速离心法，从细胞培养上清中提取细胞分泌的外泌体，标记为EXO；
S2.通过后插入法，以多肽cRGD和EXO按1：1质量比，将cRGD嵌入EXO，即cRGD-EXO；
S3.以cRGD-EXO和小分子抗肿瘤药物按10：1-1：10的质量比，将小分子抗肿瘤药物载入cRGD-EXO，得到负载多肽cRGD和小分子抗肿瘤药物的复合外泌体，即cRGD-EXO/小分子抗肿瘤药物。
7.根据权利要求6所述的复合外泌体的制备方法，其特征在于，步骤S3中cRGD-EXO和小分子抗肿瘤药物质量比1：1。
8.根据权利要求6所述的复合外泌体的制备方法，其特征在于，步骤S3中所述的载药方法为超声法、电穿孔法或共孵育法。
9.根据权利要求1-5任一所述的负载多肽cRGD和小分子抗肿瘤药物的复合外泌体在制备肿瘤治疗药物中的应用，其特征在于，所述的肿瘤为整合素αvβ3受体高表达的人恶性黑色素瘤。
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