[发明专利]一种儿童纤毛不动综合征气管类器官的培养液和培养方法在审

专利信息
申请号: 202210108196.0 申请日: 2022-01-28
公开(公告)号: CN114717177A 公开(公告)日: 2022-07-08
发明(设计)人: 陈莉娜;杨文豪;石芳;刘瀚旻;谢亮;陈婷;李艳;张瑞;卢丹莉 申请(专利权)人: 四川大学华西第二医院
主分类号: C12N5/071 分类号: C12N5/071
代理公司: 成都高远知识产权代理事务所(普通合伙) 51222 代理人: 肖柯岑;全学荣
地址: 610000 四*** 国省代码: 四川;51
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摘要:
搜索关键词: 一种 儿童 纤毛 不动 综合征 气管 器官 培养液 培养 方法
【权利要求书】:

1.一种人气管类器官培养液,其特征在于,它是含有如下各终浓度的组分的基础培养基:

GlutaMax-I添加剂1×、B27添加剂1×、HEPES缓冲液1×、青霉素-链霉素双抗溶液1×、烟酰胺3~5mM、N-乙酰基-L-半胱氨酸1~1.5mM、Y-27632 4~6μm、SB202190 400~600nm、A83-01 400~600nm、R-Spondin1 400~600ng/ml、FGF7 20~30ng/ml、FGF10 90~110ng/ml、Noggin 90~110ng/ml、EGF 1~10ng/ml,所述基础培养基为Advanced DMEM/F12培养基。

2.如权利要求1所述的人气管类器官培养液,其特征在于,它是含有如下各终浓度的组分的基础培养基:

GlutaMax-I添加剂1×、B27添加剂1×、HEPES缓冲液1×、青霉素-链霉素双抗溶液1×、烟酰胺5mM、N-乙酰基-L-半胱氨酸1.25mM、Y-276325μm、SB202190 500nm、A83-01 500nm、R-Spondin1 500ng/ml、FGF7 25ng/ml、FGF10 100ng/ml、Noggin 100ng/ml、EGF 10ng/ml,所述基础培养基为Advanced DMEM/F12培养基。

3.一种人气管上皮组织消化液,其特征在于,它是含有如下各终浓度的组分的基础培养基:

GlutaMax-I添加剂1×、HEPES缓冲液1×、青霉素-链霉素双抗溶液1×、灰色链酶菌蛋白酶XIV 0.1~0.3mg/ml、胶原蛋白I 300~500U/ml、Y-27632 5~15μm、脱氧核糖核酸酶I5~15U/ml,所述基础培养基为Advanced DMEM/F12培养基。

4.如权利要求3所述的消化液,其特征在于,它是含有如下各终浓度的组分的基础培养基:

GlutaMax-I添加剂1×、HEPES缓冲液1×、青霉素-链霉素双抗溶液1×、灰色链酶菌蛋白酶XIV 0.25mg/ml、胶原蛋白I 400U/ml、Y27632 10μm、脱氧核糖核酸酶I10U/ml,所述基础培养基为Advanced DMEM/F12培养基。

5.一种人气管类器官培养试剂盒,其特征在于,它包括权利要求1或2所述的培养液和/或权利要求3或4所述的消化液。

6.如权利要求5所述的试剂盒,其特征在于,所述试剂盒是儿童气管类器官培养的试剂盒;优选为患有纤毛不动综合征的儿童气管类器官培养的试剂盒。

7.一种人气管类器官培养方法,其特征在于,它使用权利要求5或6所述的试剂盒培养人气管类器官。

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