[发明专利]基于单链抗体片段的融合蛋白、纳米组装体及其制备方法和应用

权利要求书

1.一种纳米组装体，其特征在于，所述纳米组装体由融合蛋白与疏水性可降解聚酯通过疏水相互作用结合构成，不同种融合蛋白的单链抗体片段不同；所述融合蛋白由具有疏水区域的蛋白、免疫调节性抗体功能片段构成，所述具有疏水区域的蛋白、免疫调节性抗体功能片段直接连接或者通过肽接头连接，所述免疫调节性抗体功能片段为单链抗体片段，所述单链抗体片段具有特异性识别和结合抗原的能力；所述疏水性可降解聚酯为与水亲和力差的脂肪族聚酯，或聚乙二醇修饰的脂肪族聚酯；所述脂肪族聚酯为聚丙交酯、聚乙交酯、聚（乙交酯-co-丙交酯）和聚己内酯中的至少一种，所述具有疏水区域的蛋白为白蛋白。

2.根据权利要求1所述的纳米组装体，其特征在于，所述单链抗体片段选自以下中的至少一种：来源于人或其他物种CD137L，CD137，OX40L，OX40, ICOSL， ICOS， CD86， CD80，CD28， LFA3， CD2， CTLA4，PDL1, PD1， CD70， CD27， GAL9， TIM3，CD111， CD96， CD112，CD226， CD115，CD113， TIGIT， CD39， CD73， CD47， SIRPα，TNFα， IL1β， IL6， TGFβ， IL-10，IL-12抗体的单链抗体片段。

3.根据权利要求1所述的纳米组装体，其特征在于，所述白蛋白是人血清白蛋白、小鼠血清白蛋白、牛血清白蛋白、大鼠血清白蛋白、兔血清白蛋白、鸡卵清白蛋白中至少一种。

4.根据权利要求1所述的纳米组装体，其特征在于，所述白蛋白是人血清白蛋白。

5.根据权利要求2所述的纳米组装体，其特征在于，所述单链抗体片段包含至少一个VH和至少一个VL。

6.据权利要求5所述的纳米组装体，其特征在于，所述单链抗体片段与白蛋白通过连接肽连接，所述连接肽是[GGGGS]n，或(EAAAK)n，n为整数的任意一种。

7.根据权利要求6所述的纳米组装体，其特征在于，所述单链抗体片段与白蛋白连接结构包含下式至少一种：VL-VH-AC，VL-VH-AN，VH-VL-AC， VH-VL-AN， VL-VH-L-AC，VL-VH-L-AN， VH-VL-L-AC， VH-VL-L-AN，其中L是连接肽，AC是白蛋白序列碳端，AN是白蛋白氮端。

8.根据权利要求7所述的纳米组装体，其特征在于，所述单链抗体片段与白蛋白连接结构为VL-L-VH或为VH-L-VL。

9.根据权利要求1-8任一项所述的纳米组装体，其特征在于，由至少两种融合蛋白组装而成。

10.根据权利要求9所述的纳米组装体，其特征在于，所述融合蛋白为两种，或者三种。

11.根据权利要求1所述的纳米组装体，其特征在于，所述脂肪族聚酯为聚丙交酯。

12.根据权利要求11所述的纳米组装体，其特征在于，所述聚丙交酯为左旋聚丙交酯、右旋聚丙交酯或外消旋聚丙交酯；所述聚丙交酯的端基为酯基、羧基和羟基中的至少一种。

13.根据权利要求12所述的纳米组装体，其特征在于，所述聚丙交酯为左旋聚丙交酯，所述左旋聚丙交酯的端基为酯基。

14.根据权利要求13所述的纳米组装体，其特征在于，所述左旋聚丙交酯的分子量范围为7200~1100000道尔顿。

15.根据权利要求14所述的纳米组装体，其特征在于，所述左旋聚丙交酯的分子量范围为

137000~240000道尔顿。