[发明专利]一种诃子肉中诃子酸制备方法及其含量测定方法

说明书

本发明涉及中药化学成分的制备和检测领域，具体涉及一种诃子肉中诃子酸制备方法及其含量测定方法。本发明所提供的一种从诃子肉中制备诃子酸的方法，产品纯度可达99%以上，转移率可达70%以上，可作为标准品或对照品在诃子的质量控制中的应用。并且，方法操作步骤简单，所用设备成本低，可应用于工业化生产，适用于大量诃子对照品的制备。本发明所提供的诃子中诃子酸的含量测定方法，能够准确检测诃子肉中诃子酸的含量，为建立诃子的质量标准提供了理论基础和实验依据，对促进诃子产业化发展具有重要的意义。

技术领域

本发明涉及中药化学成分的制备和检测领域，具体涉及一种诃子肉中诃子酸制备方法及其含量测定方法。

背景技术

诃子为使君子科植物诃子（ Terminalia chebula Retz.）或绒毛诃子（ Terminalia chebula Retz.var. tomentella Kurt.）的干燥成熟果实，具有涩肠止泻，敛肺止咳之功效。现代化学研究表明诃子主要化学成分为鞣质类，包括可水解的没食子鞣质和鞣花鞣质。其中含量较高的成分诃子酸就是由多个没食子酸缩合而成，结构如下：

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前期研究表明诃子酸具有极强的抗氧化能力和抗炎能力，为诃子的主要药效成分，且在诃子肉中含量可达10%，可作为质量标志物对诃子药材进行质量控制与评价。因此为合理、有效评价诃子药材质量需要制备诃子酸对照品。

然而，目前国内外对于诃子酸的分离制备还处于起步阶段，技术尚不够完善。CN105949252A，2016年9月21日公开一种诃子药材中诃黎勒酸、诃子酸和鞣花酸三种化学对照品的制备方法，其采用高效逆流色谱，从500克诃子药材中得到十几毫克诃子酸，虽然纯度达到了98%以上，但得率过低。

由已发表文献可见，目前关于诃子酸的制备方法中多以诃子果实、诃子叶或余甘子为原料，其中诃子酸在余甘子中的含量为0.5%左右，在诃子叶中为0.1~0.2%，诃子果实包括诃子肉和诃子果核，其中果核占果实重量的15~30%，申请人前期研究发现诃子酸在诃子肉中含量约为10%，而诃子果核中几乎不含有，因此对诃子果实去核取肉，再从诃子肉中制取诃子酸将是一种效率更高的途径。另外，目前制备诃子酸的方法常采用多种柱色谱法联合、高速逆流色谱法等，具有成本高、步骤繁琐等缺点，不适用工业化生产。

在现行《中国药典》2020年版一部中，对诃子的质量控制方法仅限于定性鉴别和水分、灰分、水溶性浸出物的检测，尚无含量测定方法的规定，而诃子酸可以作为质量标志物对诃子药材进行质量控制。胡绮萍等于《中药材》发表了一种关于诃子中诃子酸含量测定的方法，所用供试品提取溶剂为甲醇，然而发明人长期对诃子进行研究的经验发现诃子酸在甲醇中极不稳定，且溶剂中甲醇含量越高，其稳定性越差，这一特性对其含量测定的准确性将造成极大的影响。因此，为完善诃子的质量控制标准，建立诃子中诃子酸的准确、可重复的含量测定方法至关重要。

本发明旨在开发一种操作简单、产率高、纯度高的诃子酸制备方法以及建立诃子中诃子酸的准确、可重复的含量测定方法。

发明内容

鉴于现有技术存在的问题，本发明的目的是提供一种从诃子肉中制备诃子酸对照品的方法。本发明提供的从诃子肉中制备诃子酸的工艺所得白色结晶经核磁共振波谱鉴定为诃子酸；经HPLC检识，按峰面积归一化法计算纯度可达99%以上；该工艺对诃子肉中诃子酸的提取率可达80%以上，经ODS柱分离制备，总得率可达70%以上。本发明提供的诃子中诃子酸的含量测定方法其专属性、线性及范围、精密度、准确度和溶液稳定性均符合相关指导原则的要求，且操作简单，可用于诃子中诃子酸的含量测定，可对诃子药材进行质量检测。

为了实现上述目的，本发明提供以下技术方案。