[发明专利]桑树基因SOS3、重组载体、制备方法及其应用

说明书

本发明公开了一种桑树基因SOS3、重组载体、制备方法及其应用，桑树基因SOS3的基因序列如SEQ ID NO.1所示，其表达的蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示，桑树基因能够提高桑树的抗盐能力，使桑树能够在盐碱地区种植。

技术领域

本发明涉及生物技术领域，更具体地，涉及一种桑树基因SOS3、重组载体、制备方法及其应用。

背景技术

土壤盐渍化严重影响着全球农业发展，在我国长江以北以及许多沿海地区，土壤中盐碱含量很高。研究表明，土壤中盐碱含量超过0.25％时就会对植物造成离子失衡、渗透胁迫与氧化胁迫等伤害甚至会导致植物死亡。因此，研究植物耐盐机制与提高作物耐盐性成为许多研究者关注的焦点问题。如能获得耐盐植物品种，使得植物可以在盐碱地区种植，可提高农业的发展潜力。

发明内容

本发明的一个目的是解决至少上述问题，并提供至少后面将说明的优点。

本发明还有一个目的是提供一种桑树基因SOS3、重组载体、制备方法及其应用，桑树基因SOS3的基因序列如SEQ ID NO.1所示，其表达的蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示，桑树基因能够提高桑树的抗盐能力，使桑树能够在盐碱地区种植。

为了实现根据本发明的这些目的和其它优点，提供了一种桑树基因SOS3，桑树基因SOS3的基因序列如SEQ ID NO.1所示。

优选的是，所述桑树基因SOS3表达出的蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示。

一种含有桑树基因SOS3的重组载体。

一种含有重组载体的工程菌。

一种工程菌的制备方法，包括以下具体步骤：

S1、以NCBI中下载的已经报道的SOS3基因的氨基酸序列作为query，在川桑蛋白质数据库进行BLASTP比对，得到SOS3候选基因序列；

S2、将得到所述SOS3候选基因序列在NCBI保守结构域预测网站进行结构域预测，筛选出1条含有EF-臂结构域以及N-端含有豆蔻酰化基序的序列，即所需序列；

S3、以所述所需序列的mRNA为模板设计定量引物和全长特异引物克隆到SOS3基因的全长编码序列；

S4、选取所述SOS3基因的全长编码序列中的目的片段并插入到peasy-blunt载体中，构建出所述重组载体；

S5、将所述重组载体转入大肠杆菌中，挑取阳性克隆体，得到含有桑树基因SOS3的所述工程菌。

优选的是，步骤S4中所述的全长特异性引物为上游引物MnSOS3-F和下游引物MnSOS3-R，所述上游引物MnSOS3-F和所述下游引物MnSOS3-R的基因序列分别如SEQ IDNO.3和SEQ ID NO.4所示。

优选的是，步骤S5得到的所述含有桑树基因SOS3的工程菌具有642bp开放性阅读框，编码213个氨基酸。

一种桑树基因SOS3在增强桑树抗盐能力中的应用。

本发明至少包括以下有益效果：

本发明提供了一种桑树耐盐基因SOS3，桑树基因SOS3的基因序列如SEQ ID NO.1所示，其表达的蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示，桑树基因能够提高桑树的抗盐能力，使桑树能够在盐碱地区种植。

本发明的其它优点、目标和特征将部分通过下面的说明体现，部分还将通过对本发明的研究和实践而为本领域的技术人员所理解。

附图说明

图1为本发明的其中一种技术方案所述桑树基因SOS3克隆的电泳检测凝胶图；