[发明专利]桑树基因SOS3、重组载体、制备方法及其应用在审
| 申请号: | 202210101843.5 | 申请日: | 2022-01-27 |
| 公开(公告)号: | CN114480420A | 公开(公告)日: | 2022-05-13 |
| 发明(设计)人: | 刘丹;邱长玉;林强;李标;韦伟;曾燕蓉;唐燕梅;李韬;张朝华;朱光书;朱方容;陆晓媚 | 申请(专利权)人: | 广西壮族自治区蚕业技术推广站 |
| 主分类号: | C12N15/29 | 分类号: | C12N15/29;C07K14/415;C12N15/70;C12N1/21;C12R1/19 |
| 代理公司: | 北京远大卓悦知识产权代理有限公司 11369 | 代理人: | 许文宗 |
| 地址: | 530007 广西壮*** | 国省代码: | 广西;45 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 桑树 基因 sos3 重组 载体 制备 方法 及其 应用 | ||
1.桑树基因SOS3,其特征在于,桑树基因SOS3的基因序列如SEQ ID NO.1所示。
2.如权利要求1所述的桑树基因SOS3,其特征在于,所述桑树基因SOS3表达出的蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示。
3.重组载体,其特征在于,含权利要求1所述的桑树基因SOS3的重组载体。
4.工程菌,其特征在于,含权利要求3所述的重组载体的工程菌。
5.如权利要求4所述的工程菌的制备方法,其特征在于,包括以下具体步骤:
S1、以NCBI中下载的已经报道的SOS3基因的氨基酸序列作为query,在川桑蛋白质数据库进行BLASTP比对,得到SOS3候选基因序列;
S2、将得到所述SOS3候选基因序列在NCBI保守结构域预测网站进行结构域预测,筛选出1条含有EF-臂结构域以及N-端含有豆蔻酰化基序的序列,即所需序列;
S3、以所述所需序列的mRNA为模板设计定量引物和全长特异引物克隆到SOS3基因的全长编码序列;
S4、选取所述SOS3基因的全长编码序列中的目的片段并插入到peasy-blunt载体中,构建出所述重组载体;
S5、将所述重组载体转入大肠杆菌中,挑取阳性克隆体,得到含有桑树基因SOS3的所述工程菌。
6.如权利要求5所述工程菌的制备方法,其特征在于,步骤S4中所述的全长特异性引物为上游引物MnSOS3-F和下游引物MnSOS3-R,所述上游引物MnSOS3-F和所述下游引物MnSOS3-R的基因序列分别如SEQ ID NO.3和SEQ ID NO.4所示。
7.如权利要求5所述工程菌的制备方法,步骤S5得到的所述含有桑树基因SOS3的工程菌具有642bp开放性阅读框,编码213个氨基酸。
8.如权利要求1所述的桑树基因SOS3在增强桑树抗盐能力中的应用。
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