[发明专利]一种超灵敏DNA-生物大分子传感器、构建及其应用在审
| 申请号： | 202210100203.2 | 申请日： | 2022-01-27 |
| 公开（公告）号： | CN114487066A | 公开（公告）日： | 2022-05-13 |
| 发明（设计）人： | 刘培峰;李凤琴;顾臻 | 申请（专利权）人： | 上海市肿瘤研究所;浙江大学 |
| 主分类号： | G01N27/327 | 分类号： | G01N27/327 |
| 代理公司： | 上海恒慧知识产权代理事务所(特殊普通合伙) 31317 | 代理人： | 邬震中 |
| 地址： | 200030 上海*** | 国省代码： | 上海;31 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 灵敏 dna 生物 大分子 传感器 构建 及其 应用 | ||
1.一种超灵敏DNA-生物大分子传感器，其特征在于：所述的DNA-生物大分子传感器由溶液相、界面相和自组装的金电极组成；
所述的溶液相是含有适配体(aptamer)/信号探针(signal)双链的PBS缓冲溶液；
所述的自组装的金电极是经末端修饰巯基的辅助探针(helper)自组装的金电极；
所述的界面相是溶液相与上述电极之间的界面。
2.根据权利要求1所述的一种超灵敏DNA-生物大分子传感器，所述的生物大分子为激素、蛋白。
3.根据权利要求1所述的一种超灵敏DNA-生物大分子传感器，所述的适配体为与靶标生物大分子特异性结合的DNA或RNA。
4.根据权利要求1所述的一种超灵敏DNA-生物大分子传感器，所述的适配体为TATGGTATGCTGTGTGGTATGGGGTGGCGTGCTCT；所述的信号探针为标记了电化学指示剂的DNA链：ACACAGCATACCATA；所述的辅助探针为修饰了巯基的DNA链：TATGGTATGCTGTGT。
5.根据权利要求1所述的平台，其特征在于所述的溶液相中适配体/信号探针的摩尔浓度比为1:1～1:4，所述适配体/信号探针双链浓度为10nM～50nM；所述的辅助探针自组装浓度为0.1μM～1.5μM；所述金电极直径为0.5～5mm。
6.根据权利要求1、2、3、4或5所述的传感器的构建，其特征在于采用如下步骤：适配体预先与信号探针在室温下杂交形成适配体/信号探针双链结构，加入靶标生物大分子(target)后，生物大分子竞争性的与适配体结合形成适配体/靶标生物大分子复合物，信号探针被取代下来并进入界面相；信号探针与金电极上辅助探针杂交形成信号探针/辅助探针双链结构，从而使电化学指示剂靠近电极表面，产生增强的电子传递速率，实现对生物大分子的检测。
7.根据权利要求6所述的超灵敏DNA-生物大分子传感器的构建，其特征在于所述的信号探针标记的电化学指示剂为亚甲基蓝或二茂铁。
8.根据权利要求6所述的超灵敏DNA-生物大分子传感器的构建，其特征在于，所述辅助探针末端修饰巯基，室温下辅助探针通过S-Au键在金电极上自组装形成单分子层。
9.一种如权利要求1所述的超灵敏DNA-生物大分子传感器在生物大分子检测中的应用。
10.如权利要求所述的超灵敏DNA-生物大分子传感器的应用，其特征在于癌症样本中标志物的检测应用。
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